大家说说试剂盒培养NK细胞遇到的问题

陈平安1

想和大家聊聊在培养NK细胞时的问题，比如培养时需要注意的，如接种量？需TC处理的培养瓶?需初始NK细胞阳性率大于5%？或者说细胞停止增殖，细胞聚团等等，都可以聊聊，也可以说说自己在用的哪个公司的试剂盒

敬轩

聊得话需要抛砖引玉，不能别人直接把工艺说了吧

陈平安1

敬轩 发表于 2025-7-31 14:05
聊得话需要抛砖引玉，不能别人直接把工艺说了吧

我的错，我本意是想说遇到的问题，比如我们友康试剂盒在培养NK细胞的时候，会出现细胞不增殖的现象，排除营养，污染，状态问题。你们是否有遇到类似的问题

陈平安1

敬轩 发表于 2025-7-31 14:05
聊得话需要抛砖引玉，不能别人直接把工艺说了吧

有遇到很多问题，找不到原因，但总说个体差异也不是那回事，其中也采取了很多措施，解决了一部分

敬轩

这不是一两句就能分析清楚的了，培养箱的温度\CO2浓度，MNC提取的中性粒占比，初始流式指标，初始铺瓶密度，因子添加的节点，最好找厂家指导

陈平安1

敬轩 发表于 2025-8-1 15:35
这不是一两句就能分析清楚的了，培养箱的温度\CO2浓度，MNC提取的中性粒占比，初始流式指标，初始铺瓶密度 ...

因为一个二氧化碳培养箱里不止养了一份，所以温度和浓度的问题可能不是主要因素，另外厂家指导，我早早就问过了，他们说不出个所以然，要么说个体，要么说我们是不是弄错了什么，来现场指导嘛，也就是看着我们做一遍实验

敬轩

陈平安1 发表于 2025-8-5 14:29
因为一个二氧化碳培养箱里不止养了一份，所以温度和浓度的问题可能不是主要因素，另外厂家指导，我早早就 ...

厂家这么不靠谱，换滋养细胞法吧……比因子法成熟简单，不能光看他们宣传

陈平安1

敬轩 发表于 2025-8-5 15:08
厂家这么不靠谱，换滋养细胞法吧……比因子法成熟简单，不能光看他们宣传

滋养层现在很多客户有所了解，心里有抵触，很早之前的客户群体还没有这些认知

敬轩

陈平安1 发表于 2025-8-5 15:11
滋养层现在很多客户有所了解，心里有抵触，很早之前的客户群体还没有这些认知

那只能告诉你因子试剂盒可以用灏洋的.

陈平安1

敬轩 发表于 2025-8-5 15:16
那只能告诉你因子试剂盒可以用灏洋的.

下次试试，我记得之前好像做过对比验证

逸清草堂

陈平安1 发表于 2025-7-31 16:20
我的错，我本意是想说遇到的问题，比如我们友康试剂盒在培养NK细胞的时候，会出现细胞不增殖的现象，排除 ...

看广告他们家说的挺厉害啊

敬轩

陈平安1 发表于 2025-8-5 15:20
下次试试，我记得之前好像做过对比验证

不同试剂盒操作不一样，只要排除培养设备和计数误差之外，其他看厂家意见

敬轩

对了，个体差异的话可以测下初始流式

zp0514036

陈平安1 发表于 2025-7-31 16:20
我的错，我本意是想说遇到的问题，比如我们友康试剂盒在培养NK细胞的时候，会出现细胞不增殖的现象，排除 ...

友康培养基我用效果也不好，扩增效率很低，基础培养基不太行

hy880719

zp0514036 发表于 2025-8-5 15:41
友康培养基我用效果也不好，扩增效率很低，基础培养基不太行

灏洋的免疫细胞培养基还不错，因子怎么样？我们自己配NK因子，活化后用灏洋培养基，16天NK阳性率在90%+基本上

zp0514036

hy880719 发表于 2025-8-6 15:41
灏洋的免疫细胞培养基还不错，因子怎么样？我们自己配NK因子，活化后用灏洋培养基，16天NK阳性率在90%+基 ...

灏洋的还可以，有下限，基本能养的起来

陈平安1

逸清草堂 发表于 2025-8-5 15:24
看广告他们家说的挺厉害啊

但友康的试剂盒确实是最稳定的，做了这么多份，我们一直也是用它，只是有个别问题，我们无法明确找到问题所在

陈平安1

敬轩 发表于 2025-8-5 15:36
对了，个体差异的话可以测下初始流式

我们每份都做初始表型的，我也分析了数据，其实没有太大正相关的联系，如果只是区段分析，比如初始NK细胞阳性率在0-5%、5%-10%、10%以上，区段分析能得出初始NK阳性率越高，后期表型越高

敬轩

陈平安1 发表于 2025-8-7 15:19
但友康的试剂盒确实是最稳定的，做了这么多份，我们一直也是用它，只是有个别问题，我们无法明确找到问题 ...

哪家也不能百分之百成功啊

陈平安1

敬轩 发表于 2025-8-8 08:49
哪家也不能百分之百成功啊

所以想去和大家交流交流，找到一些原因，或者说是可以后期补救的方法，我们也尝试了一些，效果还是有的