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[无菌&限度检查] 0.4%溴麝香草酚蓝指示液配制

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药徒
发表于 3 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式

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0.4%溴麝香草酚蓝指示液如何配制?药典8005 指示剂与指示液上面溴麝香草酚蓝指示液使用0.1g定容到200ml,浓度为0.05%,但是3605 细菌生化反应培养基上面的却是使用是0.4%溴麝香草酚蓝指示液,那我如何配制0.4%浓度,称取0.4g定容到100ml,氢氧化钠溶液用需要更改吗?有其他药典或指导书参考一下

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药士
发表于 前天 06:24 | 显示全部楼层
可以的 — 原理简单,按质量比把药典配方放大/换算就行,并且氢氧化钠用量应随溶质质量按比例放大(因为 NaOH 是帮助溶解并形成可溶性钠盐,不是按最终体积比例决定)。下面把步骤、计算和注意事项都给你了,直接可操作。
结论(直接配方)配制 0.4%(w/v)溴麝香草酚蓝指示液(100 mL)
  • 称取 溴麝香草酚蓝 0.400 g
  • 加入 0.05 mol/L NaOH 溶液 12.8 mL,搅拌使完全溶解。
  • 用蒸馏水/去离子水定容至 100.0 mL,混匀。
  • 过滤(0.22 µm)或按需要灭菌,避光冷藏保存(一般 4–10 ℃)。
    (如果你手头只有 0.10 mol/L NaOH,则用量为 6.4 mL;若是 0.025 mol/L,则用量为 25.6 mL,按“摩尔数相同”换算即可。)

计算说明(验证用)药典 8005 的配方:取 0.100 g,加入 0.05 mol/L NaOH 3.2 mL,定容至 200 mL。
那说明 NaOH 的摩尔数与溶质质量成正比:
  • 原方中 NaOH 摩尔数 = 0.0032 L × 0.05 mol·L-1 = 0.00016 mol,用于 0.100 g 溶质 → 0.00016 mol / 0.1 g = 0.0016 mol/g
  • 你要配 0.400 g → 0.0016 mol/g × 0.400 g = 0.00064 mol,需要体积 = 0.00064 mol / 0.05 mol·L⁻¹ = 0.0128 L = 12.8 mL
    因此配方与上面结论一致。

关于你提出的“0.4 g 定容到 100 mL”以及 NaOH 是否要改的问题
  • 你直接把 0.4 g 定容到 100 mL(即 0.4% w/v)在质量上是正确的。
  • 必须按溶质质量把 NaOH 的量相应放大(即用 4 倍于药典 0.1 g 的 NaOH 量),否则溶解可能不完全或颜色/指示性能受影响。
  • 所以 不用改变 NaOH 的浓度(仍用 0.05 mol/L),只需按上面计算增加体积为 12.8 mL;或者若你改用不同摩尔浓度 NaOH,则按摩尔数折算(示例见上)。

其他参考 / 背景资料
  • 中国药典及试剂供应商的常见配法(用于 0.05% 或 0.5 g/L、即 0.05% 配方):取 0.1 g,加 0.05 mol/L NaOH 3.2 mL,定容 200 mL。
  • 其他实验室/标准文献也有溴麝香草酚蓝不同浓度指示液的配法(例如在某些生化/培养基方法里常见 0.4 g/L 或 0.4% 的用法),配制时同样以“按质量比例放大 NaOH 用量”为原则。

(注:以上引用用于证明配方与通行做法;不同用途的培养基/方法要求不同指示液终浓度,配制时应按所用方法或标准的要求来决定浓度。)
施工与质量控制建议
  • 分析纯、标定过的溴麝香草酚蓝;用配制试剂用水(去离子水/蒸馏水)。
  • 溶解时先把 NaOH 溶液加到溶质中、搅拌,直至澄清,再定容;注意避免过量碱使颜色提前偏移。
  • 配制后用 0.22 µm 过滤(若用于微生物培养基或对无菌有要求),或按实验室规程灭菌(滤菌或高温蒸汽灭菌视情况而定 — 注意有些指示剂耐热性有限,滤菌优先)。
  • 标注瓶签:配制日期、配制人、配方(0.4% w/v,NaOH 用量与浓度)、保存条件、有效期(实验室自定,通常数周到数月,避光冷藏)。
  • 如用于培养基敏感的 pH 终点,建议在使用前测一次 pH并按需要微调(慎用强酸强碱调整)。




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药徒
发表于 前天 08:35 | 显示全部楼层
0.4%溴麝香草酚蓝指示液的配制,简单一些就是买成品,或者按照他们官网的比例配制;0.05%的药典有规定,但这0.4%的没说,有可能不是这样配制的

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现在就是找不到0.4%配制方法但是药典上面配糖发酵液又要用到  详情 回复 发表于 前天 08:38
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药生
发表于 前天 08:38 | 显示全部楼层
配制0.4%溴麝香草酚蓝指示液可以参考以下方法:
称取溴麝香草酚蓝0.4g,加1mol/L氢氧化钠溶液0.64ml使溶解,再加水稀释至100ml,即得。

该方法与配制0.05%溴麝香草酚蓝指示液的原理一致,都是利用氢氧化钠溶液溶解溴麝香草酚蓝,只是由于浓度不同,溴麝香草酚蓝的称取量和氢氧化钠溶液的用量有所不同。
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药徒
 楼主| 发表于 前天 08:38 来自手机 | 显示全部楼层
不见猫骨头 发表于 2025-09-12 08:35
0.4%溴麝香草酚蓝指示液的配制,简单一些就是买成品,或者按照他们官网的比例配制;0.05%的药典有规定,但这0.4%的没说,有可能不是这样配制的

现在就是找不到0.4%配制方法但是药典上面配糖发酵液又要用到
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药徒
发表于 前天 10:35 | 显示全部楼层
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生物制品处:shbb@chp.org.cn
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