少用对照培养基的一种尝试

沁人绿茶.

前言

多次有人在后台问我：新版药典中每批培养基（灭菌批）都应符合培养基适用性检查的要求怎么做？针对控制菌培养基部分，可以看前文：不用对照培养基，行不？而计数培养基部分，我偶然间看到一篇研究论文觉得思路挺不错的。

整理一下论文中的主要方式，加上一些个人理解做为补充如下：

一、 策略核心：验证驱动的合规性优化

研究者选择了最具代表性的微生物计数用基础培养基（如胰酪大豆胨琼脂（TSA）和沙氏葡萄糖琼脂（SDA））作为研究对象。这类培养基成分稳定，不含不耐热的抗生素或指示剂，是进行储存期验证的理想载体。

具体实施方案为：

• 标准化批量制备：使用脱水培养基，按说明书比例批量配制，分装于耐热的三角瓶中。
• 统一灭菌处理：采用经验证的灭菌程序（121℃，15分钟）进行湿热灭菌。
• 验证储存条件与期限：将灭菌后的培养基置于2~8℃冰箱避光保存，并设定不同的时间点（如30天、60天、90天、180天）进行取样检测。
• 使用前处理：临用前，将固体培养基重融（具体方式不明），45℃水浴中保温倾注平板，并进行适用性检查。
  

二、 验证结果与可行性分析

经过系统化的验证，获得了支持该方案的有力数据：

• 促生长能力符合规定：在180天的验证期内，TSA和SDA对药典规定的所有指示菌株（如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉）的促生长能力均符合要求，回收率比值稳定在0.5~2.0的合格范围内。
• 物理性状稳定：重融后制备平板属于新鲜制备，并不存在预制培养基在保存期内出现明显的干裂、收缩等问题。
• 重融影响可控：单次重融操作符合药典要求。
  

这些结果表明，对于成分稳定的基础培养基，采用“脱水培养基 + 灭菌后密闭避光保存 + 使用前单次重融”的模式，在2~8℃下180天的储存期是可行且合规的。

三、 效率提升与成本优势

该方案的成功实施，带来了显著的效率提升和成本优化：

• 大幅减少对照培养基使用：灭菌批次减少，对照培养基仅需在周期性灭菌时使用。
• 解放人力，提高效率：将技术人员从高频、重复的配制和即时检测工作中解放出来，使其能专注于更复杂的分析任务。
• 优化资源，降低能耗：从“小批量、多批次”的灭菌模式转变为“大批量、少批次”的集中灭菌，显著降低了灭菌柜的能耗和设备损耗。
  

四、 风险控制与适用范围

我们必须清醒地认识到，此策略是 “药典允许边界内的极限腾挪” ，其成功建立在两个基础上：一是培养基适用性检查指标（目前主要为促生长能力）对基础培养基轻微变化的相对不敏感；二是药典允许重融一次。你要说一点没有影响那是不可能的。

因此，严格的风险控制至关重要：

• 明确适用范围：该策略目前仅适用于成分稳定的基础培养基（如计数培养基）。对于选择性培养基、鉴别培养基或含有热敏性成分的培养基，必须进行独立的、更严格的验证，不可直接套用此方案。
• 设定硬性报废期：必须严格遵守验证后的储存期限（如180天），到期即刻废弃，不得超期使用。
• 严格控制操作：固定重融条件，保温温度不超过45℃，且每瓶培养基仅供一次性使用，严禁反复冻融。
• 持续监测：定期对储存设备（冰箱）进行温度监控与校准，确保储存条件始终受控。
  

结论

“少用对照培养基”的尝试，是一次在合规前提下对实验室工作流程的科学优化。说是投机取巧也罢，验证充分也罢，落到实处是将药典赋予的灵活性转化为实实在在的效率和效益。如要学习使用，建议做好批量灭菌并固定好重融条件。