细菌内毒素检测方法

宫羽1314

2025版的中国药典四部里面产品细菌内毒素检测方法和20版的不一样，20版给了限值（2.0EU/g）自己计算浓度，25版的方法是这个：细菌内毒素 取本品，用助溶剂（按聚山梨酯80 2.5g与无水乙醇2.7ml的配比，充分混合后制备得到）溶解并制成0.1g/ml的溶液，再用内毒素检查用水至少稀释20倍后，依法检查（通则1143），每1g大豆磷脂（供注射用）中含内毒素的量应小于标示值。
目前条件只能使用凝胶法。样品细菌内毒素限度的标示值也不知道的情况下怎么办，我怎么计算最大有效稀释倍数，而且药典方法已经给出了浓度。如何用0.06的鲎试剂去检测样品，或者是鲎试剂的选择也需要经过计算去采购吗？
朋友可以给我解解疑惑

环湖

实验室的我不懂啊，生产的我都懂，检验一窍不通啊

可爱的飞龙

内毒素的标示值不知道，质量标准里面没有写吗

宫羽1314

可爱的飞龙 发表于 2025-12-3 11:45
内毒素的标示值不知道，质量标准里面没有写吗

细菌内毒素 取本品，用助溶剂（按聚山梨酯80 2.5g与无水乙醇2.7ml的配比，充分混合后制备得到）溶解并制成0.1g/ml的溶液，再用内毒素检查用水至少稀释20倍后，依法检查（通则1143），每1g大豆磷脂（供注射用）中含内毒素的量应小于标示值。  药典原问，没有规定限值

可爱的飞龙

宫羽1314 发表于 2025-12-3 12:56
细菌内毒素 取本品，用助溶剂（按聚山梨酯80 2.5g与无水乙醇2.7ml的配比，充分混合后制备得到）溶解并制 ...

你看药典原文，大豆磷脂那一节最后面，他说应标明每1g本品中含内毒素的限值，就是要你们公司自己标明，自己设定标准

宫羽1314

可爱的飞龙 发表于 2025-12-3 13:44
你看药典原文，大豆磷脂那一节最后面，他说应标明每1g本品中含内毒素的限值，就是要你们公司自己标明，自 ...

感谢朋友，现在遇到一个问题不是很理解，因为我是做质保的，临时去搞的质控，内毒素这块了解的不是很透彻。
第一个是：25版需要自己根据客户的产品来提供临床最大用量来计算限值。可能就是L<标示值（动态计算值），自己根据收集的数据库去定一个限值对吗？
第二个：有点搞不清楚的是20版药典有限值让自己计算浓度，根据公式用凝胶法做的。现在25版已经给了浓度然后再稀释20倍，这样到时候我有了限值还需要计算MVD吗？计算出来之后怎么做呢？
我一直想不清楚的是：如果限值还是定2.0，根据上面25版药典稀释的方法，浓度是5mg/ml，相当于稀释200倍，在20版药典限值2.0的时候，用0.06EU的鲎试剂，最大有效稀释倍数约是33倍，是不是就说明我不能用0.06的鲎试剂了，弄不清这之间的关系。好惨~~~~

机智鼠

根据2025版《中国药典》四部，细菌内毒素的检测方法已经更新。新版药典中，细菌内毒素检测方法与20版有所不同，具体如下：

1. 使用助溶剂（按聚山梨酯80 2.5g与无水乙醇2.7ml的配比，充分混合后制备得到）溶解样品并制成0.1g/ml的溶液。

2. 用内毒素检查用水至少稀释20倍后进行检测。

3. 每1g大豆磷脂（供注射用）中含内毒素的量应小于标示值。

在样品细菌内毒素限度的标示值未知的情况下，您可以通过以下步骤计算最大有效稀释倍数：

1. 将样品溶液稀释至鲎试剂灵敏度范围内。

2. 选择适合的鲎试剂，例如0.06的鲎试剂。

3. 根据鲎试剂的灵敏度和样品浓度，确定合适的稀释倍数。

综上所述，您可以根据以上步骤选择合适的鲎试剂并进行检测。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

可爱的飞龙

宫羽1314 发表于 2025-12-3 14:21
感谢朋友，现在遇到一个问题不是很理解，因为我是做质保的，临时去搞的质控，内毒素这块了解的不是很透彻 ...

如果你的标准是2.0EU/g，那还稀释200倍，就不能用0.06的鲎试剂了，现在关键你要确认标准，确认了就可以算出用什么灵敏度的鲎试剂了

宫羽1314

可爱的飞龙 发表于 2025-12-4 09:59
如果你的标准是2.0EU/g，那还稀释200倍，就不能用0.06的鲎试剂了，现在关键你要确认标准，确认了就可以算 ...

非常感谢，我现在去客户那里咨询一下他们的产品，给一个M值，然后依据给药途径和剂量计算，使用公式 L=K/M 计算内毒素限值。然后再往下看看咋做。假设2.0EU/g的话0.03的鲎试剂好像都没法用