细菌内毒素检查法稀释问题

Yinm

供试品为固体，取1g供试品稀释至4ml，还是取1g加3ml水。如果是稀释至4ml，应该怎么加液呢，需要定容吗，如果是加3ml水，那么浓度应该怎么计算呢

jinn512

条件不足，固体是可溶解的还是医疗器械，限度是多少

火舞精灵

溶液浓度计算得搞明白，不然那个C怎么办

Yinm

jinn512 发表于 2025-12-29 13:28
条件不足，固体是可溶解的还是医疗器械，限度是多少

限度为2.0EU/g,固体是可溶解的，λ为0.03EU/ml

Yinm

火舞精灵 发表于 2025-12-29 14:06
溶液浓度计算得搞明白，不然那个C怎么办

c不就是供试品浓度吗，固体溶解稀释后，是否需要考虑供试品体积，如果稀释至4ml，那是不是就应该定容，容量瓶应该怎么去内毒素

火舞精灵

Yinm 发表于 2025-12-29 15:14
c不就是供试品浓度吗，固体溶解稀释后，是否需要考虑供试品体积，如果稀释至4ml，那是不是就应该定容，容 ...

为什么要定容呢？固体样品溶解后不就有了C吗？mg/ml不就出来了吗？再往后就是不超过MVD的稀释倍数了。

jinn512

Yinm 发表于 2025-12-29 15:09
限度为2.0EU/g,固体是可溶解的，λ为0.03EU/ml

好，按1g稀释成3ml计算，代入MVD=cL/λ=(1/3（g/ml）*2.0（EU/g）)/0.03EU/ml=(0.33g/ml*2EU/g)/0.33EU/ml=0.66(EU/ml)/0.03(EU/ml)=22倍

同法计算。1g稀释为4ml则最大稀释倍数为16倍，

无需定容，只看浓度，不看体积

Yinm

jinn512 发表于 2025-12-29 15:24
好，按1g稀释成3ml计算，代入MVD=cL/λ=(1/3（g/ml）*2.0（EU/g）)/0.03EU/ml=(0.33g/ml*2EU/g)/0.33EU/m ...

稀释成3ml，操作中是加2ml水吗，还是加3ml，不用考虑供试品体积吗

Yinm

火舞精灵 发表于 2025-12-29 15:20
为什么要定容呢？固体样品溶解后不就有了C吗？mg/ml不就出来了吗？再往后就是不超过MVD的稀释倍数了。

实际操作中是加水至4ml还是加3ml呢，供试品体积需不需要考虑呢

火舞精灵

Yinm 发表于 2025-12-29 15:52
实际操作中是加水至4ml还是加3ml呢，供试品体积需不需要考虑呢

固体体积不需要考虑，药典凡例上有规定

jinn512

Yinm 发表于 2025-12-29 15:51
稀释成3ml，操作中是加2ml水吗，还是加3ml，不用考虑供试品体积吗

不用，默认你的固体溶解在水中溶解为小分子，不考虑体积，稀释成几ml就是加几ml的水

不见猫骨头

第一、你陷入了一个思维误区，细菌内毒素是生化这块的，它稀释的时候是用移液枪操作，你说的固体制剂可以完全溶解，也就是它不占体积，所以不用定容；
第二、按照药典1143细菌内毒素检查法，固体制剂算浓度C的时候有一个公式c=λ/L
c为供试品溶液的浓度，当L以EU/mg或EU/U表示时，c的单位需为mg/ml或U/ml，当L以EU/ml表示时，则c等于1.0ml/ml。如需计算在MVD时的供试品浓度，即最小有效稀释浓度，可使用公式c=λ/L；

a72736650

问题描述就存在问题了。。固体供试品一般都是描述为取供试品1g，加4ml水溶解混匀      或者取供试品1g，制备成浓度为0.25g/ml的溶液
不要用稀释至这个词