染菌法做校正因子可以只用TSA培养基么

小铁犇

初始污染菌做完方法适用性后，需要做校正因子，但是我们的产品初始菌很低，采用染菌法。

用灭菌后的产品，染萎缩芽孢杆菌，测试回收率，可以只做TSA吗？有没有必要再做SDA平板，把TSA和SDA加和来计算？

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可以看下19973.1，染菌染得就是芽孢，只能用TSA，并没说要染真菌，我觉得不用做，我们是只用TSA计算的

世间始终你好

这个问题问得非常专业，也正是很多企业在方法适用性/校正因子（Recovery factor）阶段容易纠结的点。我直接给你结论 + 依据 + 实操建议，按药典/审评口径来讲。

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一、先给明确结论（重点） 用灭菌产品染萎缩芽孢杆菌（ATCC 6633）做回收率/校正因子：

只做 TSA 是可以接受的，也是主流做法；
一般“没有必要”再做 SDA，也不需要 TSA+SDA 加和计算。

前提是：

• 你校正的对象是 细菌（芽孢）
  
• 校正因子用于 细菌计数（TAMC / 微生物限度 / 初始污染菌）
  
  

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二、为什么“只做 TSA”是合理的？ 校正因子本质校正的是「方法对目标微生物的回收能力」你现在的设计是：

• 灭菌产品（无背景菌）
  
• 人工染菌：萎缩芽孢杆菌（细菌）
  
• 目的：评估样品基质、前处理、过滤/稀释等对细菌回收率的影响
  
  

那么：

校正对象 = 细菌
培养基 = 细菌适用培养基（TSA）

这是逻辑闭环的。

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药典/ICH 的隐含逻辑就是「谁被校正，用谁的培养基」无论是：

• 《中国药典》1105 / 1106
  
• USP <61> / <62>
  
• EP 2.6.12
  
  

对于方法适用性、回收率评价，都有一个共同点：

人工接种的微生物，用其适宜培养基进行回收评价

萎缩芽孢杆菌 = 细菌
TSA 是标准培养基
没有任何条款要求：

做细菌回收时，必须同时上 SDA

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三、那 SDA 是干嘛用的？什么时候才有必要？SDA 的定位是：

• 霉菌 / 酵母（TYMC）
  
  

以下情况，才“有必要”考虑 SDA： 情况 1：你在做「霉菌/酵母方法适用性」比如：

• 人工染 白色念珠菌 / 黑曲霉
  
• 评估 TYMC 的回收率
  
  

那必须用 SDA

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情况 2：你要同时建立「TAMC + TYMC 的校正因子」极少见，但审评上是可能的：

• 同一个产品
  
• 分别对 细菌 & 真菌都做人工染菌
  
• 各自计算校正因子
  
  

那就是：

• 细菌 → TSA → 细菌校正因子
  
• 真菌 → SDA → 真菌校正因子
  
  

不是加和，而是“各算各的”

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四、为什么“不建议 TSA + SDA 加和计算”？这是你问题里的关键误区点，我重点说清楚
原因 1：两种培养基计数对象不同培养基目标微生物
TSA细菌
SDA霉菌/酵母 你染的是 萎缩芽孢杆菌
SDA 上：

• 理论上 不该长
  
• 长了反而是污染/假阳性
  
  

把 TSA + SDA 加和：没有任何药典依据

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原因 2：审评老师会直接问一句话

“你这个 SDA 的数据，是为了说明什么？”

如果你回答不上来目的，
这个 SDA 反而变成多余、甚至是风险点。

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原因 3：校正因子是“针对方法对某一类微生物的影响”不是为了算一个“总数”，
而是为了回答：

样品前处理会不会抑制细菌生长？

那就看 TSA 回收率即可

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五、结合你“初始污染菌很低”的实际情况，给你一个推荐方案（审评友好） 推荐方案（最稳妥）

• 灭菌产品
  
• 染萎缩芽孢杆菌（推荐 30–100 CFU / 膜 或 / mL）
  
• 按常规方法操作（过滤/稀释）
  
• 只用 TSA 平板计数
  
• 计算回收率：
  回收率 (%) = 样品回收 CFU / 对照回收 CFU × 100
• 若 ≥50%（或 70%，看你内控），即可接受
  
• 得到细菌的校正因子（如需要）
  
  

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六、一句话总结（你可以直接写在方案/报告里的那种）

本次校正因子研究采用灭菌产品人工接种萎缩芽孢杆菌，
以 TSA 作为适宜培养基进行细菌回收率评价。
由于研究对象为细菌，不涉及真菌/酵母计数，
因此未采用 SDA 平板。

小铁犇

世间始终你好 发表于 2026-1-2 18:51
这个问题问得非常专业，也正是很多企业在方法适用性/校正因子（Recovery factor）阶段容易纠结的点。我直接 ...

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