有关于凝胶限度法检测内毒素实践操作的问题

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1、在药典1143中，干扰试验的表头第二项叫“内毒素浓度/被加入内毒素的溶液”，而凝胶限度法中表头第二项叫“内毒素浓度/配制内毒素的溶液”，这俩是有实际区别的嘛？
2、关于B组的供试品阳性对照组，其设立的目的是什么？我总感觉其作用和干扰试验有点重合。
3、如果一份样品MVD是4，准备稀释到最大倍数做检测，在配制B组溶液的时候，目前有两种想法：①直接样品稀释4倍，然后取1.5ml（举例）混1.5ml 4λ的标准品水溶液（CSE+BET）；②样品先只稀释2倍，然后然后取1.5ml（举例）混1.5ml 4λ的标准品水溶液（CSE+BET），使其总的稀释倍数为4，内毒素浓度为2λ。这两种方法哪种更好呢？还是说有明显的对错之分？

jinn512

第一个是没什么区别的，只是一个是稀释过程中的称呼，一个是稀释完成后的称呼
第二个，干扰试验本就是为了排除干扰，方便日常检测的验证动作，所以，B组作用就是类似的，日常的供试品阳性就是干扰试验的供试品阳性的简化版本
第三，你要知道一个概念，以你的想法为例，你的4λ的样品与你的供试品等体积混合后，混合液的溶液内毒素含量是2λ+1/2的供试品溶液中的内毒素含量，即，供试品与内毒素溶液是相互稀释的，再次与鲎试剂混合后，此时的内毒素浓度是大于鲎试剂反应灵敏度的，所以供试品阳性必须阳，不然就是存在干扰。
总结，你只能按第二个方法做，你按第一个方法是会超出你的MVD的

羽遥

1、有区别：“被加入内毒素的溶液”指供试品溶液本身（考察样品基质干扰）；“配制内毒素的溶液”指溶剂（如水，考察标准品溶解的准确性）。
2、目的：供试品阳性对照组（PPC）是日常监控，证明本次实验条件下样品无干扰；干扰试验是方法建立，证明某个稀释倍数可行。两者是先后验证关系，不重合。
3、方式②正确，方式①错误。方式①稀释过度（最终样品浓度1:8，超过MVD=4），PPC已失去验证意义；方式②最终样品浓度正好1:4，符合MVD要求