求助：凝胶内毒素检验

哈尔滨-HR

一款医疗器械产品，为亲水性不溶于水的凝胶，现在要开发其内毒素检验方法，卡住啦，求助大神指点！如何开发方法，尤其是如何浸提呢？

怡红丶小爷

进来混个金币看看

不见猫骨头

不清楚你说的那种凝胶特性，不过你可以试试其它溶剂，例如：无水乙醇、无水甲醇、二甲基亚砜等等去浸提

机智鼠

内毒素检验对于确保医疗器械的安全性至关重要，尤其是针对亲水性不溶于水的凝胶类材料。根据《中国药典》和相关医疗器械行业标准（例如YY/T 0142-2008），内毒素的检测通常采用凝胶法或动态浊度法。

对于您的凝胶产品，建议首先参考《中国药典》中的“细菌内毒素检查法”以及相关的医疗器械行业标准。这些标准提供了详细的步骤和方法，包括如何从样品中提取内毒素、如何进行定量分析等。具体到浸提过程，需要根据凝胶的性质选择合适的溶剂，并确保在浸提过程中避免污染。此外，还需要考虑样品的处理方式，如是否需粉碎、研磨等，以保证内毒素的有效释放。

在进行实验前，请务必阅读并理解所有相关的安全指南和操作规程，确保实验室人员的安全。同时，建议与专业的第三方检测机构合作，以确保测试的准确性和可靠性。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

a540909367

没有接触过，等专业老师回答 ，学习一下

ldt2008

印象中可以使用“无菌低内毒素 DMSO溶解-（要求≤0.015 EU/mL，与 BET 水 内毒素限值一致）”---供参考

神经蛙sta

进来学习一下

洪峰job

建议：根据产品的使用情况，采用模拟浸提的方法进行。浸提液和浸提温度，就模拟使用环境的。

Mr●小肚子♂

既然不溶于水，考虑下打碎浸提？浸提方法可以参考下9251

Doo1

学习一下!！1

mxl12325

1.不溶于水，是否可溶于其他溶剂。如果可溶，该溶剂是否影响内毒素检验
2.是否可以用理化方法破坏凝胶使其可溶，重点是这理化方法不能影响内毒素。
3.不可溶凝胶对内毒素检验的影响主要是内部内毒素无法释放出来，可以考虑将凝胶烘干，粉碎，再进行浸提，但是这样方法适用性比较难做。烘干时间，温度，会不会引入额外内毒素，粉碎效果等等都要考虑。

a540909367

学习一下！

哈尔滨-HR

重组C因子法是目前检测胶原蛋白类产品内毒素的推荐方法。该方法通过采用生物梅里埃重组C因子试剂盒或龙沙重组C因子试剂盒进行测定，具有以下优势：

特异性强：只与内毒素反应，不受β-葡聚糖干扰

灵敏度高：检测限可达<0.005 EU/mL

重复性好：回收率在50%-200%范围内，符合药典标准要求

哈尔滨-HR

凝胶法是传统的内毒素检测方法，通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应形成凝胶来判断内毒素含量。对于难溶性凝胶样品，需要特别注意：

样品前处理：将胶原蛋白液形成胶原凝胶后，加入内毒素检查用水进行浸泡，取浸提液进行检测

温度控制：在35-38℃条件下保温，避免温度波动影响凝胶形成

干扰试验：必须进行干扰试验验证方法的适用性

A西红柿炒鸡蛋

亲水性不溶于水凝胶的内毒素检验方法开发要点
1. 浸提方法选择

对于不溶于水的亲水性凝胶，需通过物理或化学方法促进内毒素释放：

物理浸提&#8204;：采用均质化处理（如高速剪切、超声破碎）破坏凝胶结构，增加内毒素释放表面积&#8204;。
化学浸提&#8204;：使用表面活性剂（如Tween-80）或调节pH值（如碱性溶液）改变凝胶亲水性，但需验证对鲎试剂的干扰&#8204;。
温度控制&#8204;：在37±1℃恒温下浸提至少1小时，确保内毒素充分释放&#8204;。
2. 方法验证关键步骤
干扰试验&#8204;：需通过加标回收率（50%-200%）验证浸提液对鲎试剂无抑制或增强作用&#8204;。
标准曲线构建&#8204;：使用内毒素工作标准品（CSE）制备2λ、λ、0.5λ、0.25λ系列浓度，确保曲线在2λ范围内有效&#8204;。
阳性/阴性对照&#8204;：设置含2λ内毒素的阳性对照和空白阴性对照，确保结果可靠性&#8204;。
3. 注意事项
器具处理&#8204;：所有接触样品的器具需250℃干烤30分钟以上，避免外源性内毒素污染&#8204;。
操作环境&#8204;：在超净工作台中进行，防止微生物污染&#8204;。
结果判定&#8204;：孵育60±2分钟后，缓慢倒转180°观察凝胶形成情况，避免振动导致假阴性&#8204;。
4. 参考标准
遵循《中国药典》1143细菌内毒素检查法&#8204;。
参考GB/T 14233.2-2005医用器具检验方法&#8204;。

通过以上步骤，可系统开发亲水性凝胶的内毒素检验方法，重点解决浸提难题并确保方法可靠性。

需要具体浸提参数表吗？可以帮你整理不同温度/时间组合的对比实验方案，快速锁定最优条件。

CCAA

中国药典25版，有明确写