首次原创分享：生物制剂清洗验证限值计算（一）

药窕淑女

生物制剂的清洗验证（一）

限值计算

最近在看PDATR 49Pointsto Consider for Biotechnology Cleaning Validation，将自己看的一些知识分享给大家，希望对在做生物制剂的清洗验证相关人员有所帮助。由于一次无法看全，会陆续更新，蒲友们持续关注哈。

一、    清洗残留的分类

生物制剂根据其工艺流程，清洗残留分为几大类：

1．  上游发酵/细胞培养物残留

根据上游的工艺，又将残留分为以下几类，并介绍各自使用的设备

a)        未使用的，没有进行菌株培养的培养基，一般用到的设备为培养基配制罐，培养基储存罐和接种罐。

b)        已经过菌株培养的培养基（包含菌株），一般用到的设备为种子发酵罐，产品发酵罐，菌株分离设备。

c)        已经过菌株培养的培养基（菌株已被移除），一般用到的设备为菌株分离后的产品储存罐。

2．  下游产品残留

根据下游的工艺，又将残留分为以下几类，并介绍各自使用的设备

a)        产品的盐溶液，一般包括的设备为纯化设备，浓缩设备

b)        制剂产品（包含产品和辅料），设备一般包括配制设备，过滤系统和灌装设备

3．  缓冲液残留

a)        缓冲液残留指的是不包括产品的一些盐溶液，主要设备为缓冲液的制备罐，缓冲液的过滤系统和储存罐。

4．  清洁剂残留

a)        清洁剂的残留包括表面活性剂和酸碱液。用到清洗剂的设备都涉及到清洗剂残留

二、        残留限值的计算

生物制剂的活性残留主要是蛋白质，蛋白质在高温，高PH下，一定的程度上会分解成水溶性的低聚物或自由氨基酸。由于这些原因，在生物制剂的清洗验证中，不直接设置测量活性物质的限值。一般选择非专属性的方法如TOC，通过和活性物质进行相关来计算活性物质的残留。

1．  制剂的限值计算

a）   对于生物制剂的下游，如制剂产品，选择的限值计算和小分子化学残留计算一样，均是通过最大允许残留量（MAC）来计算。尽管活性物质会降解，但是仍基于活性物质计算，因为假定这是代表最差情况。

b）   通过计算1/1000最低日治疗量的方法计算出限值，然后转换成TOC限值，可以通过TOC的方法来检测活性残留。

c）   如果想用注射用水的TOC标准500ppb，必须证明注射用水的标准比换算的标准还严格，否则直接用注射用水的标准是不合适的。

2.   原料的限值计算

a）   对于原料部分，如果用MAC的方法计算，设备面积很大，限值很低，换算成TOC后，超出TOC的定量限，无法检测TOC值。

b）   根据工艺能力的援救，原料的清洗残留检测方法依然选择传统的检验方法，这样也更容易实现，依然选择TOC的方法，根据PDA，一般设定标准如下：上游如含有细胞的物料，TOC标准为5-10ppm，下游如纯化设备，一般选择1-2ppm。如果设备是专用的，限值还可以适当的提高。

备注：内容基本是PDATR 49的内容，主要根据自己的理解，整理了一下，具体的计算方法见PDA49的附录15，最近也在做这方面的工作，正好整理出来与大家分享，希望对蒲友们有用哈

顺便将PDA TR49作为附件分享给大家

红茶.

如果想用注射用的TOC标准500ppb，必须证明注射用水的标准比换算的标准还严格，——是否简单对比即可？

冰城

残留的问题确实是清洁验证很复杂的一部分，易清洁非共线还简单些，最怕共线某些成分未知或不易检测。

药窕淑女

红茶. 发表于 2014-12-30 14:07
如果想用注射用的TOC标准500ppb，必须证明注射用水的标准比换算的标准还严格，——是否简单对比即可？

是要对比的，如果通过限值换算的TOC比500ppb小的话，用注射用水的标准就不合适了

一沙一叶

真了不起   

cph2345

太不容易了。

红茶.

药窕淑女 发表于 2014-12-30 14:11
是要对比的，如果通过限值换算的TOC比500ppb小的话，用注射用水的标准就不合适了

假设比灭菌注射用水还要小的，那用什么东西来替代。

88995258

学无止境啊！

蓝色星期六

PDA报告如圣经啊，呵呵

无为

谢谢分享

药窕淑女

红茶. 发表于 2014-12-30 14:22
假设比灭菌注射用水还要小的，那用什么东西来替代。

首先通过化学方法计算出一个限值，然后将限值换算成TOC限值，并将这个TOC限值和500ppb比较，如果大于500ppb，可以用注射用水标准500ppb，因为这样更严的控制了，如果小于500ppb，只能以换算后的toc限值作为标准

红茶.

药窕淑女 发表于 2014-12-30 15:35
首先通过化学方法计算出一个限值，然后将限值换算成TOC限值，并将这个TOC限值和500ppb比较，如果大于500p ...

不好意思啊，我的意思是，如果灭菌注射用水不能拿来对比用的话，那采用其他什么参比试剂，且如何制备呢？

茱萸

学习学习，谢谢楼主分享

药窕淑女

红茶. 发表于 2014-12-30 15:38
不好意思啊，我的意思是，如果灭菌注射用水不能拿来对比用的话，那采用其他什么参比试剂，且如何制备呢？

不知道我理解的正不正确哈
如果没有注射用水，直接用换算过后的TOC限值也是可以的，如计算的结果是600ppb，就以600ppb作为标准，如果计算出是300ppb，就以300ppb作为标准

这里提到注射用水是指有的公司可能没经过计算，直接用注射用水的标准500ppb来作为标准了，但是这个500ppb是不是合适，是更严的控制可以接受，如果是放宽，就不可以接受了。

生物制剂好多属于蛋白类，我也不是很理解为什么要控制的这么严，理论上，很容易降解，如果用热碱或者热水，都能降解的，这里可能是挑战，防止没有降解的蛋白存在吧。
个人意见，不知对不对

冷雪清风

PDA49的附录15能否分享下

药窕淑女

冷雪清风 发表于 2015-3-24 16:26
PDA49的附录15能否分享下

附录15就在分享的PDA后面，里面有具体的计算方法

xu290606838

药窕淑女 发表于 2014-12-30 15:35
首先通过化学方法计算出一个限值，然后将限值换算成TOC限值，并将这个TOC限值和500ppb比较，如果大于500p ...

这里其实还是需要考虑到注射用水的TOC值。我觉得严格意义上来说，可以同时取一个注射用水做空白，这样对于这个检测数值更有意义。这个标准应该就是单指活性成分的TOC值。