适用性检查

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按照25版药典，每次配培养基都需要做适用性检查，我想了解一下如果是配菌种传代所用一支支的琼脂斜面培养基，需要怎么做适用性检查呢？

wzzz2008

多配点，部分做适用性检查，部分做斜面。

stupid22273

1、传代用斜面做适用性？目的是啥？做了能保存的好，不做保存不好？传代用斜面做不做适用性不会对传代结果有任何影响吧。
2、药典里规定的培养基适用性的目的和应用范围是：微生物计数和无菌检查。

羽遥

根据《中国药典》2025年版的相关规定，配制菌种传代所用的琼脂斜面培养基，其适用性检查主要包括无菌性检查和灵敏度检查，具体操作如下：
- 无菌性检查：每批培养基一般随机取不少于5支（瓶），置各培养基规定的温度培养14天，应无菌生长。
- 灵敏度检查：
    - 菌种准备：所用菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存和确认，以保证试验菌株的生物学特性。常用菌株包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉等。
    - 菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，（30～35）℃培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中或沙氏葡萄糖琼脂培养基上，（20～25）℃培养2～3天。上述培养物用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度菌悬液。接种黑曲霉至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基或马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，（20～25）℃培养5～7天或直到获得丰富的孢子，加入适量含0.05%（mL/mL）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或含0.05%（mL/mL）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，然后制成适宜浓度的孢子悬液。
    - 培养基接种：取适宜装量的胰酪大豆胨琼脂斜面培养基，分别接种不大于100cfu的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照。接种细菌的培养管培养时间不超过3天，接种真菌的培养管培养时间不得超过5天。
    - 结果判定：空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。