高效液相色谱仪进样的问题

TIANQIZHIYAO

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（40：60）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按升麻素苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备  取升麻素苷对照品及5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml各含60μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品细粉约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，称定重量，水浴回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液各3μl与供试品溶液2μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含升麻素苷（C22H28O11）和5-O-甲基维斯阿米醇苷（C22H28010）的总量不得少于0.24%。

这是药典中防风的含量测定，请问，如果对照品溶液和供试品溶液各进样10微升，可以吗？请老师解答

zysx01234

常见的有进10或20，自己看着办

hongwei2000

这是一个神奇的标准
要知道仪器厂家只能保证进样的重复性
而不能完全保证完全准确的线性的
也就是3ul不一定是2ul的准确的1.5倍的
所以你会看到USP中规定的进样量要求的都是相同体积的
而且不同峰宽和峰高都可能会影响积分行为
导致对积分结果的影响
还第一次见到有这样的方法
供试品和对照品进样体积不同的
我国真是神奇

zysx01234

峰高不平顶，进样量稍微大一点好，20ul先试一下，不行改为10ul.

zysx01234

靠，当我没说，这个方法比较奇怪。

zysx01234

这是外标法还是面积归一法，看这个结果是外标法。一般都是进样量一样，最多乘以某个校正因子，这个操作方法比较稀奇。

尘み缘

实际操作当然没什么大的问题~但你这么做怎么写记录呢~那样的话你还得做方法验证~还得改标准~你这个工程就大了~ 还是按它写的做吧

gx真武阁

hongwei2000 发表于 2017-11-24 16:00
这是一个神奇的标准
要知道仪器厂家只能保证进样的重复性
而不能完全保证完全准确的线性的

中国药典里还有好多个中药材是这样对照品和供试品进样体积不一样的

zhoudingch

可以改，但需要分析方法验证来支持，个人认为可以根据评估一下，只做准确度和线性，中间精密度就差不多了

蔡文静1986

每一个分析方法都有其线性范围，一般做分析方法验证做线性范围就在80%-120%，如果进行体积过大，超出其线性范围，不妥。

RQkTkkjYOA

药典中好多品种都是对照品和样品进样量不一样，到底应该怎么办？