分析方法中色谱柱温提高2℃，如何验证

menghlt

大家好，有个问题想
咨询下前辈们，我们产品一直采用美国药典方法检测杂质，但发现有一个未知杂质和已知杂质峰保留时间特别接近，有时甚至重叠，经过摸索发现，将柱温提高2℃后，这两个杂质峰会有很好的分离，因此打算将分析标准中的柱温提高2℃，但是这样会与药典标准不一致，需要对分析方法验证。目前不明白的地方是，直接采用提高的柱温条件进行验证就可以了吗？需不需要说明为什么提高柱温，以及说明提高柱温可以达到分离效果

zysx01234

微小变化属于方法学验证中的耐用性范畴。

若平

柱温好像有正负5度的调动吧，看看药典的指导原则

hongwei2000

如果要说明相同的分离效果
可以用耐受性来验证
如果不是同的效果
这就不是耐受性的验证范围了
以你后一种方法来说
前面的方法是不耐受的
也就是说前面的方法对于你的产品来说是无效的
你要按照你的新方法进行验证

Doitasyoulike

Column Temperature (HPLC): The column temperature can be adjusted by as much as ±10°. Column thermostating is
recommended to improve control and reproducibility of retention time. Applies to both gradient and isocratic separations
你要理解为什么USP要求用户必须做药典方法的确认，尽管这个方法已经在很多USP实验室证明其适用性。
USP在621中对于柱温允许调节的范围达到了+/-10℃。所以你需要考察该USP方法对于你们实验室的适用性，通过适当的调节柱温，达到最好的分离效果，主要柱温在允许的调节范围内，不会说你违反USP方法。
所以在你的方法确认中需要进行耐用性的研究且包括柱温的微调研究