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[微生物检查] 菌种传代

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药徒
发表于 2019-5-20 10:14:05 | 显示全部楼层 |阅读模式

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有关菌种传代感觉有好多疑问,之前请过一个老师来讲过,细节问题感觉不是很完善,也没有实操,真正开始准备了,感觉有些小细节穿插不太好,按照买回来的从金黄色葡萄球菌冻干粉说明书,再加上之前老师讲的,实操差不多是如下过程:

  • 75%酒精的脱脂棉消毒冷冻管盖。
  • 无菌环境旋开复溶液的滴瓶盖,吸取1ml左右复溶液,加入冷冻管中。震荡,成悬浊液(酒精灯附近)
  • 无菌吸管吸取悬浊液到复溶液做好标识,30-35℃培养24-48h,这是第一代工作菌,(感觉应该不能用来做阳性)
  • 挑取菌膜,在无菌营养琼脂斜面上培养24-48h,第二代工作菌
  • 准备10个9%9ml无菌生理盐水,梯度稀释,确定合适梯度(第二代工作均可以用好多次)
  • 第三代是挑取一接种环第二代菌,在10ml营养肉汤中培养24h,然后挑取菌膜重复步骤4
  • 这是我自己根据理解整理的,不知道对不对,希望大家给纠正一下,明后天想做一下实操,谢谢

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药徒
 楼主| 发表于 2019-5-20 11:22:43 | 显示全部楼层
请老师们指导一下,我感觉有很多错的
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药徒
 楼主| 发表于 2019-5-21 08:49:47 | 显示全部楼层
老师们能指导一下吗
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药徒
发表于 2019-5-24 09:34:39 | 显示全部楼层

回帖奖励 +2 金币

第五步没看懂
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大师
发表于 2019-5-24 09:53:54 | 显示全部楼层
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大师
发表于 2019-5-24 09:54:29 | 显示全部楼层
去这个帖子吧,东西下载后自己学,悄悄滴%%
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药徒
 楼主| 发表于 2019-5-24 10:43:55 来自手机 | 显示全部楼层
依然星期三 发表于 2019-5-24 09:34
第五步没看懂

第五步是梯度稀释,找到做阳性合适的剃度
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药徒
 楼主| 发表于 2019-7-29 15:57:18 | 显示全部楼层
vabs 发表于 2019-5-24 09:54
去这个帖子吧,东西下载后自己学,悄悄滴%%

谢谢
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发表于 2019-7-29 16:02:24 | 显示全部楼层
菌种传代、使用、销毁记录
菌种传代(G0)(购入)
菌种名称                菌种编号       
数量                生产商       
领用日期                储存条件       
有效期                销毁方法        121℃30分钟高压灭菌。
销毁人/日期                复核人/日期       
第一代(G1)菌种复苏
复苏方法        按菌种说明书要求复溶菌粉,转种于适宜的增菌培养基内复苏。
菌种编号                传代数量       
传代日期                操作人       
培养时间                培养温度       
有效期                复苏培养基        TSB
用途        菌种传代        销毁方法        121℃30分钟高压灭菌
销毁人/日期                复核人/日期       
第二代(G2)菌种复壮
传代方法        将复苏后菌液接种至平板上,在适当温度下培养复壮。
传代日期                操作人       
传代数量        4        用途        菌种传代、确认、保存
培养时间                培养温度       
传代培养基                有效期       
销毁方法        121℃30分钟高压灭菌        菌种确认结果       
平板编号        1                销毁人/日期                复核人/日期       
        2                销毁人/日期                复核人/日期       
        3                销毁人/日期                复核人/日期       
        4                销毁人/日期                复核人/日期       
菌种保存:挑取平板上纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管、液体石蜡管、磁珠管,作为保存菌种。
保存方式        □甘油冷冻管-20℃       □液体石蜡管-20℃          □磁珠管-20℃
有效期                销毁方法        121℃30分钟高压灭菌。
菌种
编号        1                销毁人/日期                复核人/日期       
        2                销毁人/日期                复核人/日期       
        3                销毁人/日期                复核人/日期       
        4                销毁人/日期                复核人/日期       
        5                销毁人/日期                复核人/日期       
        6                销毁人/日期                复核人/日期       
        7                销毁人/日期                复核人/日期       
        8                销毁人/日期                复核人/日期       
        9                销毁人/日期                复核人/日期       
        10                销毁人/日期                复核人/日期       
        11                销毁人/日期                复核人/日期       
        12                销毁人/日期                复核人/日期       
第三代(G3)工作菌
传代方法        将二代菌种接种于斜面培养基,适宜温度下培养。
上一代菌种编号                上一代菌种保存方法       
传代日期                传代数量       
操作人                传代培养基       
培养时间                培养温度       
用途        工作菌种        有效期       
储存条件        2-8℃冰箱保存        销毁方法        121℃30分钟高压灭菌
菌种编号        1                销毁人/日期                复核人/日期       
        2                销毁人/日期                复核人/日期       
        3                销毁人/日期                复核人/日期       
        4                销毁人/日期                复核人/日期       
        5                销毁人/日期                复核人/日期       
        6                销毁人/日期                复核人/日期       
        7                销毁人/日期                复核人/日期       
        8                销毁人/日期                复核人/日期       
        9                销毁人/日期                复核人/日期       
        10                销毁人/日期                复核人/日期       
        11                销毁人/日期                复核人/日期       
        12                销毁人/日期                复核人/日期       
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药徒
 楼主| 发表于 2019-7-29 16:03:37 | 显示全部楼层
徐金玲 发表于 2019-7-29 16:02
菌种传代、使用、销毁记录
菌种传代(G0)(购入)
菌种名称                菌种编号       

谢谢
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发表于 2020-1-14 11:06:11 | 显示全部楼层
vabs(李) 发表于 2019-5-24 09:53
https://www.ouryao.com/thread-283760-1-1.html

你好,这个文件没有了,可以再发一次吗

点评

我找找,看看能不能找到,百度盘给封了  发表于 2020-1-14 11:50
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发表于 2020-1-14 13:40:30 | 显示全部楼层
紫色依草 发表于 2020-1-14 11:06
你好,这个文件没有了,可以再发一次吗

谢谢啦,

点评

https://545c.com/file/12649781-417721551 百度网盘被禁,不再使用,临时传到这个网盘。分享时间根据下载量确定。目前还有29天,请尽快下载。  详情 回复 发表于 2020-1-14 21:31
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大师
发表于 2020-1-14 21:31:07 | 显示全部楼层

https://545c.com/file/12649781-417721551

百度网盘被禁,不再使用,临时传到这个网盘。分享时间根据下载量确定。目前还有29天,请尽快下载。
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