无菌包装纸塑包装和EO灭菌后长菌的问题

落羽惊风

    我们的产品包装是特卫强封口纸和吸塑盒结合的包装方式，采用环氧乙烷灭菌。在短周期灭菌验证中，IPCD的菌片只有一个长菌了，但10个无菌产品做下去的试验，只有一个TSB培养基中没长菌。
    用同一批产品走灭菌公司的拼柜灭菌，做了5组无菌检验，，48小时左右整个培养基就非常浑浊，时间大约在EO灭菌的15天之后，环乙残留合格了。
    两次试验对照培养基都是阳性对照浑浊，阴性对照澄清；对浑浊的培养基提取1ml放在TSA培养基中培养，长满细菌。无菌检验室在实验开始前开启臭氧1小时，而后传递窗和超净工作台开启紫外灯半小时，个人认为无菌检验室应该是处于无菌状态，每次取样品前都会在手上（手套）和样品包装上喷涂75%酒精，并在酒精灯附件打开包装，将产品拆开后直接投入TSB和硫乙醇酸盐液体培养基中。
    我们对这一批产品的包装做了检验，纸塑剥离强度试验合格（最小2N），甲苯胺蓝渗漏试验合格（有一个在20s左右渗出，但5s的时候在合格状态），在甲苯胺蓝渗漏试验中发现，特卫强封口纸有液体渗出，而渗出的位置没有任何破损和折痕。
    想请教下各位大神，特卫强封口纸渗出液体正常吗？会不会导致无菌屏障失效？还是其他什么原因导致的？

MatthewLuan

1.怀疑实验室无菌操作，建议回顾一下无菌的方法学验证中有无问题，这个不准其他就别谈了。
2.短周期产品长菌，很可能是灭菌参数有问题，若IPCD和产品都只有一个长，怀疑IPCD抗性不够，产品最难灭菌点的分析不准确，或者产品存在封闭段。
3.灭菌时应该有EPCD的培养，结合培养结果分析。
4.短周期产品有菌为何还要拼柜灭菌？先解决短周期产品有菌问题吧。

落羽惊风

MatthewLuan 发表于 2019-6-21 08:10
1.怀疑实验室无菌操作，建议回顾一下无菌的方法学验证中有无问题，这个不准其他就别谈了。
2.短周期产品长 ...

1.无菌方法学验证已经完成，这个没问题，实验室的无菌操作我们最近会再复盘几次，包括请专家来。
2.产品最难灭菌的位置无法放置BI，也有金属硬配合造成的封闭段，有ABS的塑料螺纹连接，这些位置我比较担心灭菌不到位。目前BI放置的位置是，BI能放到的最难灭菌的位置

leelsy

在短周期灭菌验证中，IPCD的菌片只有一个长菌了，但10个无菌产品做下去的试验，只有一个TSB培养基中没长菌。---这个短周期是失败的，而且你的IPCD选择也是失败的，验证是无效的。
    用同一批产品走灭菌公司的拼柜灭菌，做了5组无菌检验，，48小时左右整个培养基就非常浑浊，-----这个代表灭菌是失败的，灭菌工艺（可能还涉及到产品特性和装载）有问题。
在甲苯胺蓝渗漏试验中发现，特卫强封口纸有液体渗出，而渗出的位置没有任何破损和折痕。----特卫强封口纸渗出液体是正常的，不会导致无菌屏障失效。

落羽惊风

后面原因找到了，灭菌是成功的，试验过程中使用的无菌手套是带菌的，试验前进行30分钟的紫外灯照射用处不是太大，后面更换了手套就没长过菌了

落羽惊风

leelsy 发表于 2019-11-28 10:26
在短周期灭菌验证中，IPCD的菌片只有一个长菌了，但10个无菌产品做下去的试验，只有一个TSB培养基中没长菌 ...

后面原因找到了，灭菌是成功的，试验过程中使用的无菌手套是带菌的，试验前进行30分钟的紫外灯照射用处不是太大，后面更换了手套就没长过菌了

文一刀

是 实验室无菌操作 阶段的问题！！