关于无菌内毒素的加样问题

朝歌

按照这个课件中是0.1ml鲎试剂+0.1ml含2λ内毒素的供试品，这样最终溶液不是只含λ内毒素？不是0.1ml鲎试剂+0.1ml含4λ内毒素的样品？这样最终溶液才是含2λ的内毒素？

朝歌

课件鲎试剂灵敏度是0.125，所以2λ就是0.25，图中供阳和阳性都是0.1ml含有2λ内毒素和0.1ml鲎试剂混合，这样不是稀释成λ？有这方面的大佬能解答一下么？

卡卡123456

最终反应浓度时2λ，所以加进去的内毒素浓度是4λ.

朝歌

卡卡123456 发表于 2020-10-23 15:58
最终反应浓度时2λ，所以加进去的内毒素浓度是4λ.

课件中的E0.25就是2λ，按照图上就是取0.1mlE0.25加到0.1ml鲎试剂中，不就是取0.1ml2λ加入0.1ml鲎试剂做成阳对，实际浓度应该是λ；如果按你说应该是取0.1mlE0.5加到0.1ml鲎试剂中吧？

卡卡123456

朝歌 发表于 2020-10-23 16:06
课件中的E0.25就是2λ，按照图上就是取0.1mlE0.25加到0.1ml鲎试剂中，不就是取0.1ml2λ加入0.1ml鲎试剂做 ...

是的，加0.5λ.

朝歌

卡卡123456 发表于 2020-10-23 16:09
是的，加0.5λ.

所以是课件出问题咯？不是我理解有错

卡卡123456

关于这个你可以再仔细看看药典章节，只要确定反应终点浓度是2λ，你自然就了解应该怎么加。我是认为按你表述的意思课件上的加入方式是有问题的，因为它最终的反应终点浓度只有λ。

百花开

课件没有错啊，是你理解有偏差了，溶液浓度是指和鲎试剂反应之前的溶液浓度，不是加入鲎试剂之后稀释的浓度。你看药典就知道了，“制成2λ 、λ 、0.5λ和0.25λ 四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30 秒或参照标准品说明书中要求的混匀时间进行操作。取不同浓度的内毒素标准溶液，分别与等体积(如0.lml) 的鲎试剂溶液混合，每一个内毒素浓度平行做4 管;”这是药典鲎试剂灵敏度复核里面的原话。