液相异常峰

小林1234567

近期在重现原料厂家方法时，主峰出现下图情况，色谱条件（用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.003mol/L 十二烷基硫酸钠水溶液（取十二烷基硫酸钠 0.865g，加水溶解并稀释至 1000ml，加入三氟乙酸 0.5ml）（43:57）为流动相；柱温为35℃；检测波长为280nm；进样体积 100μl），有哪位大神解答一下是什么原因呢？

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泡泡的忧伤

高效液相色谱峰拖尾可能由多种原因引起，以下是一些常见的原因和解决方法：
1. 与硅胶表面残余硅醇基的相互作用：以常用的 C18 色谱柱为例，硅胶表面会有各种形态的硅羟基。流动相中的样品与色谱柱硅胶颗粒表面上的酸性或离子化硅羟基基团相互作用会导致拖尾。可通过添加碱性流动相添加剂（如三乙胺）来减少拖尾现象。使用高纯度碱性去活硅胶颗粒色谱柱，通常可不使用扫尾剂而获得对称峰型；
2. 样品中的碱性化合物：碱性化合物更容易与色谱柱中的硅羟基发生次级相互作用形成拖尾；
3. 色谱柱污染：流动相和样品中的杂质会污染色谱柱内填料。需使用高纯度的流动相试剂（流动相所用的各种溶剂至少是分析纯，尽量使用色谱纯试剂，水使用超纯水或全玻璃器皿双蒸水），并确保储存流动相的容器清洁。用前先用 0.45μm 溶剂微孔过滤，除去可能存在的微粒。复杂样品可选用 0.45μm 溶剂微孔过滤或样品预处理柱对样品进行预处理，也可使用保护柱。若柱内填料污染，可将柱头螺丝卸下，用专用工具挖出柱内前段被污染填料，再以相同的填料重新填入，或以能溶解污染物的流动相按色谱柱使用的相反方向冲洗色谱柱（约 20 至 30 倍柱体积）；
4. 色谱柱物理损坏：如柱头受损、固定相变脏或流失、色谱柱塌陷等，需更换新柱；
5. 色谱柱进口处有异物：卸下柱头螺丝，取出滤帽并将其置于 20%硝酸溶液中，用超声波清洗约 20 分钟，再置于超纯水中超声清洗约 10 分钟，重新装入色谱柱内；
6. 样品浓度过高致使柱超载：适当减小进样量或样品浓度（必要时可提高检测器灵敏度），直至峰形和保留时间不再改变。正常情况下，样品中每种化合物在 150×4.6mm 柱中进样量保持在 3～50μg 范围内，一般不会引起明显超载；
7. 样品溶剂不合适：选择合适的样品溶剂，尽量选用流动相溶解样品；
8. 柱外效应：柱外死体积太大，即进样阀、色谱柱及检测器间的管路过长、直径过粗、管路接头不匹配、有死体积等。应在可能的条件下，使色谱柱的两端连接管路尽可能短，连接管内径尽可能细小，切口务必平整光滑，尽可能减小死体积；
9. 缓冲不足或不合适：在缓冲不好或离子强度过低的分离中，可能出现保留时间重现性差和峰形拖尾。增加缓冲浓度（与样品大小相匹配）可改善此情况；
10. 流动相 pH 值选择错误：不适宜的流动相 pH 可能导致某些样品存在分子型和离子型的动态平衡，或两种形态比例接近 1:1 时，离子型陆续向分子型转化而表现出拖尾。调节 pH 值可抑制分子解离，改善拖尾，对于碱性化合物，可选用相对较低的 pH 值，也可选用碱性试剂与固定相发生反应，从而阻断碱性化合物与固定相发生反应。

为了获得良好的色谱分析结果，在日常操作中需注意色谱柱的正确使用和维护，以及流动相的选择和处理等方面。如果拖尾问题仍然存在，可能需要进一步排查原因或咨询专业的色谱技术人员。

yuansoul

貌似 主峰 精神分裂了。。。

连头发丝都写着

加了表面活性剂  是单通道进样吗

18186386804

老师有需要采购杂质对照品吗？

seo_0401

空白在这个位置有出峰吗？空白溶剂是流动相吗？