细菌内毒素凝胶法干扰试验求助

未来医药界大佬

求教:细菌内毒素凝胶法干扰试验中B组是用供试液一步一步稀释标准品到2λ、λ、0.5λ和0.25λ，还是用供试液稀释4λ标液，然后得到2λ(即供试液:4λ标液=1:1);供试液稀释2λ标液，然后得到λ,以此类推即可.举个例子：标准品10EU/mL,加1ml BET水溶解后,直接用供试液一步一步稀释到2λ、λ、0.5λ和0.25λ,还是用BET水稀释到4λ,然后再用供试液稀释到2λ?
看《中国药品检验标准操作规范》，是用供试液一步一步稀释标准品到2λ、λ、0.5λ和0.25λ，但是这样的话又怎么解释药典中的稀释倍数?而且供试品浓度也是有变化的.

恳求大神赐教！

Mr●小肚子♂

用供试品溶液稀释肯定没问题，另外提醒一下，标准品也应该用供试品溶液溶解，这样是不是更严格呢

林俊涛｜科标医

B组的标准品必须全程用供试液稀释至目标浓度，不可先用BET水稀释中间浓度！ 只有这样才能真实反映供试品对内毒素检测的干扰作用。

jianing4233312

供试液稀释标准品，结束

未来医药界大佬

Mr●小肚子♂ 发表于 2025-4-15 11:31
用供试品溶液稀释肯定没问题，另外提醒一下，标准品也应该用供试品溶液溶解，这样是不是更严格呢

《中国药品检验标准操作规范》中写的是用BET水进行的溶解，又怎么解释呢？其实我觉得也挺奇怪

落幕灬

这块可以看下药典  有个前提 这个供试液是未检出内毒素的  需要通过预实验来做的   溶解没啥问题  稀释用的就是这个未检出的供试液

Mr●小肚子♂

未来医药界大佬 发表于 2025-4-15 14:59
《中国药品检验标准操作规范》中写的是用BET水进行的溶解，又怎么解释呢？其实我觉得也挺奇怪

我理解阳性对照的那组（不加供试品）用BET水溶解，这一组可以用供试品溶液

墨鱼丸rpk

落幕灬 发表于 2025-4-15 15:17
这块可以看下药典  有个前提 这个供试液是未检出内毒素的  需要通过预实验来做的   溶解没啥问题  稀释用的 ...

预实验怎么做？0.1供试液加到0.1鲎试剂里观察是否凝固吗？

墨鱼丸rpk

落幕灬 发表于 2025-4-15 15:17
这块可以看下药典  有个前提 这个供试液是未检出内毒素的  需要通过预实验来做的   溶解没啥问题  稀释用的 ...

供试液稀释倍数选择多少倍（当然不大于最大稀释倍数）就用多少毫升浸提吗，还是可以用少量BET水浸提然后再稀释到需要的倍数？

落幕灬

规范里有教你怎么做的，简单说就是弄一系列的稀释倍数然后做对应的供阳，然后得到一个最小阴性的倍数，至于选取哪个作为日常点就看你们公司怎么规定了，日常检验就选取定下来的倍数作为稀释液