鲎试剂灵敏度复核用什么浓度的国家标准品比较好

啊？s9l

新版药典也没有规定需要用哪种，用10000EU/支或者80EU/支的国家标准品行不行，求大佬解释

Mr●小肚子♂已获得悬赏 10 金币+10 金币

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150800-201601，9000EU/支

• Mr●小肚子♂
• 发表于2025-09-04
• 详细答案 >

世间始终你好

你问的是 鲎试剂（LAL试剂）灵敏度复核时，国家标准品（细菌内毒素国家标准品）的使用浓度选择问题，对吧？
一般原则如下：

• 复核目的
  
  
  • 灵敏度复核是为了确认试剂说明书标示的灵敏度（λ值，例如0.25 EU/mL、0.125 EU/mL等）是否真实可靠。
    
  • 因此用的浓度必须覆盖 标示灵敏度附近。
    
    
• 推荐浓度选择（参考《中国药典》细菌内毒素检查法、USP<85>）
  
  
  • 复核时至少配制 4 个浓度：
    
    
    • 2λ
      
    • λ
      
    • 0.5λ
      
    • 0.25λ
      
      
  • 其中 λ 就是试剂说明书上标示的灵敏度。
    
    
• 判定标准
  
  
  • 2λ 和 λ 应全部显阳性；
    
  • 0.5λ 至少一半显阳性；
    
  • 0.25λ 应显阴性。
    
  • 结果符合上述标准，说明该批试剂灵敏度与标示一致。
    
    
• 国家标准品的配置浓度
  
  
  • 按照国家标准品瓶签标示的效价（EU/vial）先复溶。
    
  • 以标示灵敏度为目标点，再逐级稀释，制备 2λ、λ、0.5λ、0.25λ。
    
    

举例：
假设你的鲎试剂说明书标示 灵敏度 λ=0.25 EU/mL，那么要用国家标准品配出：

• 2λ = 0.5 EU/mL
  
• λ = 0.25 EU/mL
  
• 0.5λ = 0.125 EU/mL
  
• 0.25λ = 0.0625 EU/mL
  
  

这样做灵敏度复核即可。


10000EU/支或者80EU/支的国家标准品行不行，能行，但要看哪种更方便、哪一种能最少次数地做精确稀释。关键是把国家标准品（EU/vial）配成一个便于做低倍数、低误差的中间母液（比如 1000、100 或 10 EU/mL），然后做简单的等倍连稀得到 2λ、λ、0.5λ、0.25λ。下面用算例把流程和注意点都给你，照着直接用即可。

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关键判断原则（快速记住）

• 选用哪个效价的标准品，优先考虑能用最少的分步稀释次数到达目标浓度（λ 附近）。
  
• 每次稀释倍数尽量用整十（1:10、1:5、1:2、1:4 等），避免奇怪的小数倍，减少误差累积。
  
• 使用无内毒素（LAL）水/注射用水、低吸附管/瓶、精确移液设备并记录每步体积与稀释倍数。
  
• 做重复（至少平行 3–4 孔/倍），并做阳性/阴性对照。
  
  

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举例（常见目标 λ = 0.25 EU/mL —— 你也可以把下面方法套到任意 λ）A. 国家标准品 10000 EU/支（高效价）

• 建议做法：先把 10000 EU/vial 配成 10 mL → 得到 1000 EU/mL（便于后续 1:10 连稀）。
  
• 从 1000 EU/mL 做：
  
  
  • 1:10 → 100 EU/mL
    
  • 1:10 → 10 EU/mL
    
  • 1:10 → 1 EU/mL
    
  • 1:4  → 0.25 EU/mL（即 λ）
    
    
• 再做 2λ、0.5λ、0.25λ：
  
  
  • 2λ = 0.5 EU/mL（可由 1 EU/mL 做 1:2）
    
  • 0.5λ = 0.125 EU/mL（可由 0.25 EU/mL 做 1:2）
    
  • 0.25λ = 0.0625 EU/mL（若要更低） —— 这只是示例，按你要的判断点取样即可。
    
    
• 优点：虽然起始效价高，但用 1000→100→10→1 的整十稀释很容易、误差小。只要注意每步的体积不要太小（建议最低移液量 ≥ 10 &#181;L，最好 ≥ 50–100 &#181;L）。
  
  

B. 国家标准品 80 EU/支（低效价）

• 若把 80 EU 配成 1 mL → 80 EU/mL。要得到 0.25 EU/mL，需 320 倍稀释（比较多步）。
  
• 更好的做法是把 80 EU 配成 10 mL → 8 EU/mL，然后：
  
  
  • 1:10 → 0.8 EU/mL
    
  • 再做 1:3.2 → 0.25 EU/mL（但 1:3.2 不太方便）
    
    
• 或把 80 EU 配成 2 mL → 40 EU/mL，再按 1:10 连稀到便于的中间值…总之 80EU 需要设计出能用整数倍稀释得到目标的母液体积。
  
• 缺点：效价接近目标时（比如你要 0.25），往往需要不整除或较多步的稀释，增加误差与操作复杂度。
  
  

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实用建议（操作层面）

• 优先选能得到 10 或 100 或 1000 EU/mL 中间母液（因为 1:10 连稀最容易且误差小）。
  
• 尽量避免大量小体积移液（如 < 10 &#181;L）；如果不得不做小体积，用经校准的微量移液器或放大体积后再稀释。
  
• 使用无内毒素的器材与水、低吸附管，避免吸附损失（尤其低浓度时影响大）。
  
• 做每一步的稀释记录（公式、体积、倍数）并保留 CoA（标准品证书）与效价信息。
  
• 做每个浓度的平行孔数（建议 ≥ 3）并记录阳/阴性判定。
  
• 如果用高效价（10000 EU），注意溶解体积选择和储存（分装冷冻保存可减少重复冻融）。
  
• 如果经常做 0.25 EU/mL 级别的复核，建议准备一个标准化的中间库存（例如 10 EU/mL 或 100 EU/mL）并按需稀释、分装保存（注意保存条件与有效期）。
  
  

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结论与推荐

• 10000 EU/支 可用且常见，适合你想用 1:10 连稀得到 1000→100→10→1→0.25 的方案——操作上更简便、可控性好。
  
• 80 EU/支 也可用，但更容易出现“不能用整倍数稀释得到目标浓度”的情况，需要精心设计重溶体积和稀释方案以避免复杂的小数倍稀释。
  
• 因此一般推荐：如果能接受多次稀释且有严格操作流程，用 10000EU 更方便；如果只需少量标准品且能把溶解体积设计成便于后续稀释的数值，80EU 也行。
  
  

Mr●小肚子♂

150800-201601，9000EU/支

亻佥

只要是标准品就行，建议使用80EU/支的工作标准品，国家标准品会比较贵，10000EU/支的稀释操作会比较麻烦。

不见猫骨头

从中检院买的标准品吧，谁都挑不出毛病，其它的有可能有些审计官不认可

a540909367

有见过80的，还有90的，太高的不方便你操作。

jianing4233312

适合的就行，没有要求必须用哪一个.

18913555243

我也觉得，标准品没必要选择浓度过大，操作步骤越多，准确度就越低，

啊？s9l

Mr●小肚子♂ 发表于 2025-9-4 11:14
150800-201601，9000EU/支

这是哪里的标准？国标吗

啊？s9l

啊？s9l 发表于 2025-9-5 10:37
这是哪里的标准？国标吗

原来是国家标准品说明书，
bzwz.net.cn/shop/pds/1000146/89473