干烤验证中去热源内毒素验证问题

li123ms

在干烤灭菌中，需要进行去热源的验证，请问详细如何操作？
我之前有一次实验，干烤时直接将内毒素标准品（为冻干粉）放入灭菌柜内干烤，结果直接碳化。
之后进行预实验，在安瓿内加入2ml、1ml水，用锡箔纸整体包住，干烤后取出，发现已烤干，无留水。
想问问大家是如何试验的，干着放入会碳化，加水应该也会干，还是我方法有什么问题，求解？

yuansoul

温度多少？

li123ms

yuansoul 发表于 2015-4-15 10:16
温度多少？

真正验证时温度应该是250℃，现在试验（加水）的是179℃，2h

河西智叟

250℃半小时，这个是药典方法，没必要验证吧。。。描述一下你做这个的目的吧

Ivy2008

您好，我做过这个试验，做这个试验有专门用的内毒素标准品，不是冻干粉吧，应该是那种涂抹在安瓿管壁上的，250度加热也完全没有问题啊。

Ivy2008

问内毒素厂家，他们有专门做内毒素挑战性试验用的标准品

li123ms

就是新购买了干热灭菌柜，验收时需要进行去热源验证一次，
然后我们到厂FAT验收时，（由于环境及考虑不周）直接将冻干粉进行了干热灭菌，250℃，30min，取出时发现已经碳化了，
回来后考虑还有一次SAT验收要做好，想到时会加水溶解后干烤，但是不知加多少水，是否会烤干，于是这几天进行预实验。
在小型烤箱内正常干热，即179℃，2h进行干烤。
我们分别在安瓿内加入0.5ml、1ml、2ml水，用锡箔纸整个包住封严，（之前有仅包住安瓿口，结果部分冲出）灭菌后发现还是干了，
想问问大家是具体怎么操作的。

cph2345

内毒素挑战用的指示剂看起来就是空的安瓿瓶。楼主应该是用的检验用的那种类似于100EU/支的冻干品吧？那里面是有其他东西的。

li123ms

Ivy2008 发表于 2015-4-15 10:46
问内毒素厂家，他们有专门做内毒素挑战性试验用的标准品

是去当地的中检所问，还是鲎试剂生产厂家；
我们买内毒素标准品是在湖北省检定研究院购买的，这种标准品也在那买吗

li123ms

Ivy2008 发表于 2015-4-15 10:46
问内毒素厂家，他们有专门做内毒素挑战性试验用的标准品

还可以问一下，你们买的内毒素标准品（干烤验证用）是多少单位的吗，？EU/ml

bigdogpolice

楼主不会把鲎试剂放进去了吧？

zhenren29

本来就是常温层流下吹干后进行试验的

Ivy2008

li123ms 发表于 2015-4-15 10:53
还可以问一下，你们买的内毒素标准品（干烤验证用）是多少单位的吗，？EU/ml

我们买的湛江安度斯的，要求细菌内毒素至少下降不少于3个对数单位，用的是1250EU/瓶的。

Ivy2008

Ivy2008 发表于 2015-4-15 11:17
我们买的湛江安度斯的，要求细菌内毒素至少下降不少于3个对数单位，用的是1250EU/瓶的。

去热原用内毒标准品应不低于1000吧

li123ms

明白了，之前联系了买鲎试剂的厂家，他们有卖，使用说明书也看了，感觉还可以

唐晓宇

晕倒，看到最后发现楼主已经解决问题了，普通检验注射用水的内毒素肯定不能直接进行干热处理的，验证用的1250EU内毒素现在是常用标准品

zyreno

Ivy2008 发表于 2015-4-15 11:17
我们买的湛江安度斯的，要求细菌内毒素至少下降不少于3个对数单位，用的是1250EU/瓶的。

楼上的正解！也可是其他厂家的，但要注意指示剂含量和D值

xs1233

采购专门用于验证的指示剂，含量大于1000的

li123ms

预计会购买2500EU/ml的， 下降三个对数。鲎试剂购买0.25EU的

hjf980221

li123ms 发表于 2015-4-16 13:36
预计会购买2500EU/ml的， 下降三个对数。鲎试剂购买0.25EU的

学习了，刚好用到！