请教细菌内毒素挑战性试验

daomingda

请教各位老师，做干热灭菌柜、隧道烘干灭菌柜设备验证的时候，细菌内毒素挑战试验应该怎么进行？

大呆子

    要做细菌内毒素灭活验证试验，细菌内毒素灭活验证试验是证明除热原过程有效性的试验。一般将不小于1000单位的细菌内毒素加入待去热原的物品中，证明该去热原工艺能使内毒素至少下降3个对数单位。细菌内毒素灭活验证试验所用的细菌内毒素一般为大肠杆菌内毒素。

daomingda

大呆子 发表于 2012-5-8 12:22
要做细菌内毒素灭活验证试验，细菌内毒素灭活验证试验是证明除热原过程有效性的试验。一般将不小于1000 ...

呵呵，哥哥，我也知道应该下降3log值，主要我想问一下具体应该如何操作。

大呆子

daomingda 发表于 2012-5-8 15:48
呵呵，哥哥，我也知道应该下降3log值，主要我想问一下具体应该如何操作。

错，应该叫叔叔

用待验证产品溶液配制适当浓度

daomingda

大呆子 发表于 2012-5-8 15:55
错，应该叫叔叔

用待验证产品溶液配制适当浓度

呵呵~可是待验证产品只是白钢器具和玻璃管制抗生素瓶啊，那样该怎么做？

圣剑之心

按中国药典《细菌内毒素检查法》规定操作。

一次心

根据空载、装载的热分布数据，找出空载及各类装载的最冷点；在最冷点上放置热原瓶进行挑战。

daomingda

一次心 发表于 2012-5-8 22:47
根据空载、装载的热分布数据，找出空载及各类装载的最冷点；在最冷点上放置热原瓶进行挑战。

我想要的是具体的操作方法，不是理论，验证指南上全是理论，可是实际操作起来就全是问题了。

daomingda

圣剑之心 发表于 2012-5-8 22:20
按中国药典《细菌内毒素检查法》规定操作。

我想要的是具体的操作方法，不是理论，验证指南上全是理论，可是实际操作起来就全是问题了。

华佗

daomingda 发表于 2012-5-9 10:04
我想要的是具体的操作方法，不是理论，验证指南上全是理论，可是实际操作起来就全是问题了。

可以把你实际操作中的问题疑问说出来！不然大家没解决目的！

hengjiang

干热灭菌柜、隧道烘干灭菌，去买炙热芽孢杆菌回来，放到干热灭菌柜、隧道烘干灭菌里或是放在瓶子里，同产品一起做试验，灭完菌后然后按微生物培养方法进行操作。

daomingda

hengjiang 发表于 2012-5-10 09:03
干热灭菌柜、隧道烘干灭菌，去买炙热芽孢杆菌回来，放到干热灭菌柜、隧道烘干灭菌里或是放在瓶子里，同产品 ...

您说的是微生物挑战性试验，在干热灭菌柜、隧道烘箱杀菌干燥机的再确认里面，微生物挑战性试验和细菌内毒素挑战性试验都是要求做的，因为微生物挑战性试验验证的是灭菌效果，而细菌内毒素挑战性试验验证的是除热源效果。

daomingda

binlu521 发表于 2012-5-10 08:59
可以把你实际操作中的问题疑问说出来！不然大家没解决目的！

5.4.3.4.1.3  细菌内毒素试验：（附件18）
5.4.3.4.1.3.1  合格标准：
细菌内毒素至少下降不少于三个对数单位，内毒素测试应不大于0.25EU/ml。
5.4.3.4.1.3.2  实施内容：
生物指示剂的选择：细菌内毒素工作标准品（120EU）。
                  中国药品生物制品检定所。
装载：细菌内毒素工作标准品3支，标记编号，并应尽可能放在灭菌器的冷点，记录样品的放置位置。
灭菌：同满载热分布同时进行。
检验：照“细菌内毒素检查法标准操作规程”进行检验。
试验次数：进行3次确认试验，结果必须一致，否则应分析原因，采取纠正措施后重新试验。
数据分析：对试验获得的数据进行分析并确认，详细数据见附件18。
5.4.3.4.1.3.3  装载方式：
设备自身测温探头（5-D -I）处放置一只；前、后门处各放置一只。

daomingda

hengjiang 发表于 2012-5-10 09:03
干热灭菌柜、隧道烘干灭菌，去买炙热芽孢杆菌回来，放到干热灭菌柜、隧道烘干灭菌里或是放在瓶子里，同产品 ...

5.4.3.4.1.3  细菌内毒素试验：（附件18）
5.4.3.4.1.3.1  合格标准：
细菌内毒素至少下降不少于三个对数单位，内毒素测试应不大于0.25EU/ml。
5.4.3.4.1.3.2  实施内容：
生物指示剂的选择：细菌内毒素工作标准品（120EU）。
                  中国药品生物制品检定所。
装载：细菌内毒素工作标准品3支，标记编号，并应尽可能放在灭菌器的冷点，记录样品的放置位置。
灭菌：同满载热分布同时进行。
检验：照“细菌内毒素检查法标准操作规程”进行检验。
试验次数：进行3次确认试验，结果必须一致，否则应分析原因，采取纠正措施后重新试验。
数据分析：对试验获得的数据进行分析并确认，详细数据见附件18。
5.4.3.4.1.3.3  装载方式：
设备自身测温探头（5-D -I）处放置一只；前、后门处各放置一只。

daomingda

hengjiang 发表于 2012-5-10 09:03
干热灭菌柜、隧道烘干灭菌，去买炙热芽孢杆菌回来，放到干热灭菌柜、隧道烘干灭菌里或是放在瓶子里，同产品 ...

这个是我做的验证方案，请您帮我看一下，提出一下指导性意见好吗？

daomingda

binlu521 发表于 2012-5-10 08:59
可以把你实际操作中的问题疑问说出来！不然大家没解决目的！

这个是我做的验证方案，请您帮我看一下，提出一下指导性意见好吗？

daomingda

圣剑之心 发表于 2012-5-8 22:20
按中国药典《细菌内毒素检查法》规定操作。

5.4.3.4.1.3  细菌内毒素试验：（附件18）
5.4.3.4.1.3.1  合格标准：
细菌内毒素至少下降不少于三个对数单位，内毒素测试应不大于0.25EU/ml。
5.4.3.4.1.3.2  实施内容：
生物指示剂的选择：细菌内毒素工作标准品（120EU）。
                  中国药品生物制品检定所。
装载：细菌内毒素工作标准品3支，标记编号，并应尽可能放在灭菌器的冷点，记录样品的放置位置。
灭菌：同满载热分布同时进行。
检验：照“细菌内毒素检查法标准操作规程”进行检验。
试验次数：进行3次确认试验，结果必须一致，否则应分析原因，采取纠正措施后重新试验。
数据分析：对试验获得的数据进行分析并确认，详细数据见附件18。
5.4.3.4.1.3.3  装载方式：
设备自身测温探头（5-D -I）处放置一只；前、后门处各放置一只。

daomingda

圣剑之心 发表于 2012-5-8 22:20
按中国药典《细菌内毒素检查法》规定操作。

这个是我做的一个验证方案，请您帮我看一下，提出一下指导性意见好吗？

hengjiang

daomingda 发表于 2012-5-10 10:30
这个是我做的验证方案，请您帮我看一下，提出一下指导性意见好吗？

呀，你这样，提出采用细菌挑战性试验，找到你们公司做微生物的，找一下里面有培养SOP的，按照那个方法制定结果判定。

放样时根据面积的大小，一般不低于8个点。

看不见我看不见

daomingda 发表于 2012-5-10 10:26
您说的是微生物挑战性试验，在干热灭菌柜、隧道烘箱杀菌干燥机的再确认里面，微生物挑战性试验和细菌内毒 ...

使用内毒素挑战试验对干热的方法除热原进行了成功的验证，将不再使用用生物指示剂方法进行无菌验证