蒲公英 - 制药技术的传播者 GMP理论的实践者

搜索
查看: 1832|回复: 3
收起左侧

[质量控制QC] 层析柱有关问题

[复制链接]
发表于 2020-1-4 10:11:36 | 显示全部楼层 |阅读模式

欢迎您注册蒲公英

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册

x
大孔树脂和中性氧化铝装柱之前需要做怎样的处理?加70%乙醇之后直接装到塞有薄棉花的10ml注射器里3cm,上面加1cm的中性氧化铝,总堵不滴溶液是怎么回事,求教大神指点
回复

使用道具 举报

药徒
发表于 2020-1-4 14:36:47 | 显示全部楼层
干法直接装柱,湿法混匀后再装柱。一般用层析柱,下方有类似筛板的填充层,不用加棉花。
中性氧化铝是有目数区别的,太小了容易堵,要根据提取液来定。
回复

使用道具 举报

宗师
发表于 2020-1-5 10:29:11 | 显示全部楼层
先给树脂柱中加入1/3的水,然后将准确量好体积的D101树脂用水转移到树脂柱中,再用70%的乙醇2倍树脂体积处理,流速为1倍树脂体积,过完醇后用水洗至无醇味即可进行使用。
回复

使用道具 举报

宗师
发表于 2020-1-5 10:29:38 | 显示全部楼层
3.操作方法〔1~3〕:
3.1.装柱:将D101大孔吸附树脂用丙酮浸泡过夜(大约15~18h),用水浴回流8h,过滤(或抽滤),用水洗至溶液:水(1∶2)不产生混浊为止,浸泡在水中,再进行装柱,并在柱顶加少量氧化铝,制成预处理柱,备用。
3.2.样品预处理:精密吸取样品5ml(固体样品制成相当浓度的溶液),加入已处理好的D101大孔树脂层析柱中,用100ml水洗脱(含蔗糖样品用300ml水),洗液弃去(流速1.5ml/min)。再以原流速用30ml无水乙醇分次洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣用无水乙醇溶解,定量转移至5ml容量瓶中,稀释至刻度,作为供试品溶液。
3.3.标准曲线制备:精密吸取绞股蓝皂甙标准液0、20、40、60、80μl,于10ml具塞试管中,在水浴上挥干溶剂,精密加入5%香草醛冰醋酸溶液0.5ml,高氯酸1.5ml,混匀。于60℃水浴上加热15~20min,冰水浴冷却,加入5.0ml冰醋酸,摇匀,以相应的试剂为空白,于545nm处比色测吸光度。
3.4.样品测定:精密吸取供试品溶液100μl,置具塞试管中,按3.3.项下方法进行,测出吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中绞股蓝皂甙的重量。
回复

使用道具 举报

宗师
发表于 2020-1-5 10:30:08 | 显示全部楼层
大孔吸附树脂使用说明

保存:AB-8 大孔吸附树脂在运输和贮存过程中,应保持在 4℃—40℃的环境中,密闭保存,大孔吸附树脂装柱  大孔吸附树脂装柱

避免过冷或过热,不使树脂失水。在符合储运要求的情况下保质期为 1 年。

产品说明:

规格标准:

产 品 名称:大孔吸附树脂

牌(型)号:AB-8

结 构:苯乙烯型共聚体 PDVB

极 性:弱极性

技术指标:

粒 径 范围:0.3—1.25(mm)>90%

含 水 量:65—75%

湿 真 密度:1.05--1.09(g/ml)

湿 视 密度:0.68—0.75(g/ml)

表 观 密度:0.28—0.34(g/ml)

骨 架 密度:1.13---1.17(g/ml)

比 表 面积:480—520m2/g

平 均 孔径:130—140Ao

孔 隙 率:42--46%

主要用途:

AB-8 大孔吸附树脂广泛用于天然植物中提取分离纯化各种皂苷类活性物质如:人参皂苷、

三七皂苷、原花青素、色素、甜菊糖等。

树脂性能:

该树脂为人工合成的一种高分子大孔吸附剂,特点是利用该树脂能发生吸附、解吸作用,以

达到物质的分离、净化目的。它与活性炭、氧化铝、硅胶等天然吸附剂的作用很相象,但又

不同。它的特点是容易再生,可反复使用。

该树脂是以二乙烯苯为骨架结构的吸附剂,连接在主链上的苯环是一个电子分布均匀的平面,

对于一些性质相近的分子和多种环状芳香族化合物有很强的吸附能力,且随被吸附分子的亲

油性加强而增加。它近年来在天然产物的分离中,尤其是对水溶性化合物的分离,纯化显示

其独特效果因而在中草药提取液分离,纯化工艺占有极为重要位置。

该品物化性能稳定,不溶于酸、碱及有机溶剂,加热不熔,可在 150 度以下使用。对有机物

选择良好,不受无机盐的影响;再生容易,再生剂可选用水,稀酸、稀碱或低沸点有机溶液

如甲醇、乙醇、丙酮等。外观颜色淡白,给处理操作带来方便,容易观察,而且使用寿命长。

注意事项:

a.整个使用过程都要避免机械杂质进入树脂,复杂的原液都要经过严格过滤。

b.该树脂含水量 70%左右,需室温保存,严防冬季因含水冻结,将球体涨裂,破坏强度。

c.该树脂应湿态保存,如部分球粒暴露在空气中失水,可用乙醇或丙酮浸渍处理然后使用。

d.使用中断,停用期较长,须将树脂洗涤干净存放,并定期换水已防细菌及有机物污染。也

可浸泡在饱和食盐水或乙醇溶液中长期存放。

树脂使用方法:

a. 树脂的予处理方法:在树脂柱内加入高于树脂层 10 厘米的乙醇浸泡 4 小时,放出浸液,

至洗涤液在试管中加水稀释不浑浊并且洗脱液用紫外光谱扫描不得检出吸收峰为止。再用水

洗涤至乙醇含量小于 1%,即可使用。

树脂前处理合格评价标准:

(A)用三倍量乙醇洗脱树脂柱,洗脱液加等量水不应浑浊;

(B)洗脱液用紫外光谱扫描不得检出吸收峰;

b. 树脂装柱后可采用逆流灌注法排气,将树脂中气体排出,否则在使用中由于气阻影响吸

附。同时在使用中保持液位,以免空气进入。

c. 建议操作条件:

步 骤 流 速 流 量 备 注

填充装柱 湿法装柱,装填树脂高度小于 3 米

逆流洗柱 水洗除去小粒及破碎树脂

前 处 理 1—5BV/h 3BV 用乙醇、丙酮等进行予处理

水 洗 脱 1—5BV/h 3BV 必要时根据吸附剂的 PH 值使用缓冲溶液

吸 附 1—4BV/h 根据吸附量 应在吸附容量以下,PH=5—8,温度〈50 度上柱

药液加入盐有利于提高吸附容量

水 洗 2—3BV/h 0.5--1BV 将粘附在树脂上的杂质洗出

解 吸 0.5—3BV/h 2--3BV 乙醇、丙酮等的(含水)溶液溶出,温度升高

有利于解吸

再 生 0.5—3BV/h 3--4BV 多次应用乙醇、丙酮、碱性乙醇等溶剂

水 洗 2--3BV/h 3--4BV 碱再生后加入酸中和

备注:具体操作应根据工艺条件调整

d. 树脂的强化再生方法:

树脂使用几个周期后,吸附能力下降,可用适量 5%的 NaOH 溶液处理一次。当树脂受污染严

重吸附能力降低较大时需强化再生。其方法是在容器内加入高于树脂层 10cm 的 2%—3%盐酸

溶液浸泡 2—4 小时,然后用 3 倍于树脂体积的盐酸溶液通柱,并用净水洗至接近中性;继

用 5%的氢氧化钠溶液浸洗 2-4 小时,并同上法用 3 倍于树脂体积的同浓度的氢氧化钠溶液

通柱,最后再用净水清洗至 PH 值为中性,再用 2-3 倍树脂体积的乙醇洗柱,然后用纯水洗

去乙醇,即可投入使用
回复

使用道具 举报

宗师
发表于 2020-1-5 10:30:49 | 显示全部楼层
供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性、碱性三种:

酸性氧化铝  用1%盐酸浸泡后,用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4,用于分离酸性物质。
中性氧化铝  其悬浮液的pH为7.5,用于分离中性物质。
碱性氧化铝  其悬浮液的pH为10,用于胺或其它碱性物质的分离。我觉得还是用碱性的好了
回复

使用道具 举报

宗师
发表于 2020-1-5 10:31:03 | 显示全部楼层
胺类等碱性的物质用中性或碱性的都可以。
2、网上有卖预置的氧化铝薄板的,不过比较贵。也可以自己买200-300目的氧化铝过200目筛子再用。
3.柱子也硅胶一样干法湿法都可以。不过比较推荐干法装柱子。
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2020-1-5 18:12:00 来自手机 | 显示全部楼层
谢谢大家,学习了
回复

使用道具 举报

发表于 2021-8-9 13:06:44 | 显示全部楼层
填料粒径小了
回复

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

×发帖声明
1、本站为技术交流论坛,发帖的内容具有互动属性。您在本站发布的内容:
①在无人回复的情况下,可以通过自助删帖功能随时删除(自助删帖功能关闭期间,可以联系管理员微信:8542508 处理。)
②在有人回复和讨论的情况下,主题帖和回复内容已构成一个不可分割的整体,您将不能直接删除该帖。
2、禁止发布任何涉政、涉黄赌毒及其他违反国家相关法律、法规、及本站版规的内容,详情请参阅《蒲公英论坛总版规》。
3、您在本站发表、转载的任何作品仅代表您个人观点,不代表本站观点。不要盗用有版权要求的作品,转贴请注明来源,否则文责自负。
4、请认真阅读上述条款,您发帖即代表接受上述条款。

QQ|手机版|蒲公英|ouryao|蒲公英 ( (京)-非经营性-2014-0058 京ICP证150354号 京ICP备14042168号-1 )

GMT+8, 2024-3-29 02:12

Powered by Discuz! X3.4运维单位:苏州豚鼠科技有限公司

Copyright © 2001-2020, Tencent Cloud.

声明:蒲公英网站所涉及的原创文章、文字内容、视频图片及首发资料,版权归作者及蒲公英网站所有,转载要在显著位置标明来源“蒲公英”;禁止任何形式的商业用途。违反上述声明的,本站及作者将追究法律责任。
快速回复 返回顶部 返回列表