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菌液制备-液体培养基、琼脂培养基

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药徒
发表于 2020-12-17 10:22:23 | 显示全部楼层 |阅读模式

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微生物刚刚入行,研读药典发现,1101无菌检查部分,菌液制备这么写到“接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基上,30-35℃培养18-24小时”,液体培养基好理解,培养了之后取浓菌液1ml,10倍梯度稀释,那么琼脂培养基是做什么用呢?如何操作?
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药徒
发表于 2020-12-17 12:00:08 | 显示全部楼层
野风吹北 发表于 2020-12-17 11:06
是为难你了,没做过这个,其实还不如去招个检验员多省事儿,是不是。你这研究者杀鸡用牛刀了,不是。

也是,生物狗入这行检微生物的待遇都不高,我就是例子。而且只要文件写的清,其他专业的来搞微生物检测也没得问题
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药徒
发表于 2020-12-17 10:40:26 | 显示全部楼层
同学,你是质量经理,还是检验员啊,硕士所学的是啥专业啊?
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药徒
 楼主| 发表于 2020-12-17 10:50:11 | 显示全部楼层
野风吹北 发表于 2020-12-17 10:40
同学,你是质量经理,还是检验员啊,硕士所学的是啥专业啊?

以前做理化分析,ICP、HPLC、GC,我的问题很好笑么?
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药徒
发表于 2020-12-17 11:06:08 | 显示全部楼层
jiazhang33 发表于 2020-12-17 10:50
以前做理化分析,ICP、HPLC、GC,我的问题很好笑么?

是为难你了,没做过这个,其实还不如去招个检验员多省事儿,是不是。你这研究者杀鸡用牛刀了,不是。
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药徒
发表于 2020-12-17 11:19:43 | 显示全部楼层
野风吹北 发表于 2020-12-17 11:06
是为难你了,没做过这个,其实还不如去招个检验员多省事儿,是不是。你这研究者杀鸡用牛刀了,不是。

研究者哪里看出来他是
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药徒
发表于 2020-12-17 11:24:19 | 显示全部楼层
喔喔哦喔喔哦 发表于 2020-12-17 11:19
研究者哪里看出来他是

她是硕士,,擅长GC 、HPLC,
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药徒
发表于 2020-12-17 11:51:47 | 显示全部楼层
野风吹北 发表于 2020-12-17 11:24
她是硕士,,擅长GC 、HPLC,

硕士哪里看出来他是?
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药徒
发表于 2020-12-17 12:04:28 | 显示全部楼层
琼脂的含量决定他是固体还是液体培养基,大豆琼脂培养基就是常说的TSA培养基,是固体。我这边是直接挤破工作菌,用涂布法培养2天
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药徒
 楼主| 发表于 2020-12-17 12:10:48 | 显示全部楼层
死库水 发表于 2020-12-17 12:04
琼脂的含量决定他是固体还是液体培养基,大豆琼脂培养基就是常说的TSA培养基,是固体。我这边是直接挤破工 ...

我知道固体和液体培养基是琼脂的差别,就是不太清楚怎么用固体培养基来制备药典说的菌液,而且您说的挤破工作菌是什么意思
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药徒
发表于 2020-12-17 13:16:09 | 显示全部楼层
固体培养基是用来计数、鉴定用的。
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药徒
 楼主| 发表于 2020-12-17 14:30:03 | 显示全部楼层
派森哥 发表于 2020-12-17 13:16
固体培养基是用来计数、鉴定用的。

多谢,恍然大悟,我以为计数需要另用1105计数,我还问依照1105,白色念珠菌菌液制备后计数是不是TSA和SDA一起做呢,这下子全解决了,那么问题又来了,药典里面写“接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中,30-35℃培养24-48小时”,这里没有提计数的培养基,计数怎么操作呢?
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药徒
发表于 2020-12-17 15:01:32 | 显示全部楼层
楼主,琼脂培养基还是液体培养基都一样,増菌用的,你这个之后做应该就是定性,找培养基接种,跟计数没多大关系,如果要计数,金黄色葡萄球菌、铜绿,这些都有专门的培养基分别接种,你们应该就是定性,这些都不会定量的。
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药徒
发表于 2020-12-17 17:26:16 | 显示全部楼层
jiazhang33 发表于 2020-12-17 12:10
我知道固体和液体培养基是琼脂的差别,就是不太清楚怎么用固体培养基来制备药典说的菌液,而且您说的挤破 ...

买的成品,
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药徒
发表于 2020-12-18 11:33:08 | 显示全部楼层
jiazhang33 发表于 2020-12-17 14:30
多谢,恍然大悟,我以为计数需要另用1105计数,我还问依照1105,白色念珠菌菌液制备后计数是不是TSA和SDA ...

接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中,是做药品无菌检测用到的厌氧阳性对照,不需要计数,只需要通过肉眼观察,判断供试品中是否有无厌氧菌的存在,只需要定性。
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药徒
 楼主| 发表于 2020-12-18 11:57:20 | 显示全部楼层
制药制药制药 发表于 2020-12-17 15:01
楼主,琼脂培养基还是液体培养基都一样,増菌用的,你这个之后做应该就是定性,找培养基接种,跟计数没多大 ...

菌株增菌培养之后,依照药典,需要配制小于100cfu的菌液来加入阳性对照,所以需要进行计数检查,为什么和计数没有多大关系呢?? 需要确定小于100cfu,必须要进行计数啊,那么您指得金黄,铜绿的专用培养基分别是什么呢
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药徒
发表于 2020-12-18 12:20:10 | 显示全部楼层
本帖最后由 制药制药制药 于 2020-12-18 12:22 编辑
jiazhang33 发表于 2020-12-18 11:57
菌株增菌培养之后,依照药典,需要配制小于100cfu的菌液来加入阳性对照,所以需要进行计数检查,为什么和 ...

金黄色葡萄球菌应该是卵黄液跟B-P培养基,你去搜下国内卖培养基一般都有,并且有配制方法说明,然后去网站上下载检测标准,食品伙伴网可以参考下,直接搜要检测的菌就可以了。
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药徒
 楼主| 发表于 2020-12-18 15:03:56 | 显示全部楼层
制药制药制药 发表于 2020-12-18 12:20
金黄色葡萄球菌应该是卵黄液跟B-P培养基,你去搜下国内卖培养基一般都有,并且有配制方法说明 ...

那也就是说,药典要求配制小于100cfu的菌液,需要这样的培养基呢?但是药典没有明确说明啊
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药徒
发表于 2020-12-18 15:41:54 | 显示全部楼层
本帖最后由 制药制药制药 于 2020-12-18 16:25 编辑
jiazhang33 发表于 2020-12-18 15:03
那也就是说,药典要求配制小于100cfu的菌液,需要这样的培养基呢?但是药典没有明确说明啊

计数找标准
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药徒
发表于 2020-12-18 16:12:02 | 显示全部楼层
jiazhang33 发表于 2020-12-17 14:30
多谢,恍然大悟,我以为计数需要另用1105计数,我还问依照1105,白色念珠菌菌液制备后计数是不是TSA和SDA ...

金、铜、枯、大肠、生孢用TSA,黑曲、白念用SDA
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