环境菌收集冻存

张娇娇han

请教大家一个问题，车间收集的环境菌鉴定出是什么属或者种，一般要求多久完成冻存呢？每个车间出现的一致的环境菌也冻存还是出现了就不冻存呢？好纠结。

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医疗器械现在要求那么高了吗

依然星期三

早期建立环境菌库的时候可以都冻存起来，累计一点的数量，筛选出优势典型菌株后，每次鉴定，不需要每次都冻存了

世间始终你好

你这个问题其实是很多企业做环境监测微生物管理时的“隐性痛点”——标准里没有一句话明确告诉你“多久必须冻存”，但又不能随意不做。
我帮你梳理一下常规做法和背后的逻辑，你就知道怎么定 SOP 了。

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1. 冻存的目的

• 留样溯源：当将来出现质量事件（尤其是微生物污染）时，可以回溯环境中曾经出现过的菌株，做比对（如 PFGE、全基因组测序）。
  
• 趋势分析：观察同一菌株在不同时间、不同位置的持续性或扩散情况。
  
• 验证消毒/清洁措施的有效性。
  
  

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2. 时间要求国际和国内 GMP 及药典并没有硬性规定“发现后几天必须冻存”，所以企业一般在内部微生物管理 SOP里明确，比如：
流程节点推荐时限理由
鉴定结果确认后≤7个工作日内完成冻存避免菌株在斜面/平板上反复转接导致性状变化或死亡
如果是高风险菌（如条件致病菌、工艺敏感菌）优先在当天或次日冻存防止菌株丢失，保证可追溯性 现实里很多企业的做法：

• 鉴定送检 → 得到结果 → 当天或一周内做冻存（液氮/–80℃甘油保存）。
  
• 送外部实验室鉴定的菌株，有时会在送检前就分株一份先冻起来，以防外送耗时长菌株丢失。
  
  

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3. 是否全部冻存这里有两种主流策略：
A. 全量冻存法（较严）

• 每次鉴定出的环境菌，不管是否重复出现，都冻存。
  
• 优点：数据完整，万一有微小差异也能追踪。
  
• 缺点：工作量大、冻存资源占用多。
  
  

B. 代表菌株冻存法（常见）

• 同一车间、同一位置、同一物种（属/种）在一个趋势分析周期内（比如一年）首次出现时冻存。
  
• 后续再次出现相同物种时，仅记录，不重复冻存，除非：
  
  
  • 本次菌株耐药谱、性状明显不同
    
  • 来自不同工序/关键区域，怀疑扩散
    
    
• 优点：节省资源，便于管理。
  
  

很多企业用B方法 + 高风险全冻存补充：

• 条件致病菌（例如 Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia complex, Enterobacter cloacae 等）和特定法规关注菌 → 一律冻存
  
• 低风险常见皮肤菌（如 Staphylococcus epidermidis）→ 只留代表株
  
  

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4. 推荐 SOP 写法参考

“环境监测中鉴定出的菌株，自鉴定结果确认之日起5个工作日内完成冻存；
对同一厂房、同一物种在一个年度趋势分析周期内首次分离的菌株进行冻存，
对法规关注菌、条件致病菌及趋势分析显示风险上升的菌株，不论出现次数，均应冻存。”

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