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无菌实验

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发表于 2026-1-23 09:30:46 | 显示全部楼层 |阅读模式

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请教各位大佬,现在做的无菌实验培养第一天FTM变浑浊,TSb澄清,能否判断是否长菌
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药徒
发表于 2026-1-23 09:47:27 | 显示全部楼层
需要从几个方面进行调查
FTM空白浑浊了吗,灭菌是否。
实验中的沉降菌检测结果是不是符合要求的。
人员有没有按照要求进行洗手消毒,操作的规范性。
浑浊的FTM是阳性对照吗。
管子是否做了标记。
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 楼主| 发表于 2026-1-23 09:49:53 来自手机 | 显示全部楼层
Mayhce 发表于 2026-01-23 09:47
需要从几个方面进行调查
FTM空白浑浊了吗,灭菌是否。
实验中的沉降菌检测结果是不是符合要求的。
人员有没有按照要求进行洗手消毒,操作的规范性。
浑浊的FTM是阳性对照吗。
管子是否做了标记。

空白没有浑浊,不是阳性对照
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发表于 2026-1-23 09:59:59 | 显示全部楼层
如在加入供试品后或在培养过程中,培养基出现浑浊,培养14天后,不能从外观上判断有无微生物生长,可取该培养液不少于1ml转种至同种新鲜培养基中,将原始培养物和新接种的培养基继续培养不少于4天,观察接种的同种新鲜培养基是否再出现浑浊;或取培养液涂片,染色,镜检,判断是否有菌。疑似阳性培养物的微生物学检测:将复接种后再次出现的疑似阳性培养物,划线接种至大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)或其他微生物鉴定用培养基表面,置相应温度培养 l8~24h或直至培养基表面有菌落形成。观察并记录其菌落形态,挑取单个纯菌落进行革兰染色和镜检,观察并记录其染色特性及微生物形态学特征。并作生化实验或使用菌种鉴定系统进一步鉴定该菌种。对已通过确认鉴定后的微生物应予以保藏,保藏方法参考甘油冷冻管保藏法。疑似阳性培养物的溯源性检测:将疑似阳性培养物的菌落形态、革兰染色结果、镜检结果、生化试验结果及菌种鉴定结果与洁净室(区)采集的浮游菌、沉降菌、表面接触菌及手套菌的相应结果比对(或用其他分析手段,如微生物红外分析系统或分子生物学技术分析浑浊物与洁净区采集微生物的同源性),若浑浊物的以上结果与洁净室(区)内采集的微生物结果高度一致,则判为同源,表明该疑似阳性培养物来自洁净操作区或由于实验人员操作不当导致的污染,则该实验结果应判为无效。若比对结果显示同源性较低,则需进一步回顾无菌实验过程。
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药徒
发表于 2026-1-23 10:17:06 | 显示全部楼层
需要看是啥原因导致FTM变浑浊的,如果是样品本身的原因,则可以排除,如果可以继续培养,如果是长菌的话,看下FTM浑浊的程度(主要看下FTM氧化层是不是没有了),如果继续变浑浊,可以划线平皿中确认下是不是长菌
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 楼主| 发表于 2026-1-23 11:35:50 来自手机 | 显示全部楼层
疯眼汉穆迪 发表于 2026-01-23 09:59
如在加入供试品后或在培养过程中,培养基出现浑浊,培养14天后,不能从外观上判断有无微生物生长,可取该培养液不少于1ml转种至同种新鲜培养基中,将原始培养物和新接种的培养基继续培养不少于4天,观察接种的同种新鲜培养基是否再出现浑浊;或取培养液涂片,染色,镜检,判断是否有菌。疑似阳性培养物的微生物学检测:将复接种后再次出现的疑似阳性培养物,划线接种至大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)或其他微生物鉴定用培养基表面,置相应温度培养 l8~24h或直至培养基表面有菌落形成。观察并记录其菌落形态,挑取单个纯菌落进行革兰染色和镜检,观察并记录其染色特性及微生物形态学特征。并作生化实验或使用菌种鉴定系统进一步鉴定该菌种。对已通过确认鉴定后的微生物应予以保藏,保藏方法参考甘油冷冻管保藏法。疑似阳性培养物的溯源性检测:将疑似阳性培养物的菌落形态、革兰染色结果、镜检结果、生化试验结果及菌种鉴定结果与洁净室(区)采集的浮游菌、沉降菌、表面接触菌及手套菌的相应结果比对(或用其他分析手段,如微生物红外分析系统或分子生物学技术分析浑浊物与洁净区采集微生物的同源性),若浑浊物的以上结果与洁净室(区)内采集的微生物结果高度一致,则判为同源,表明该疑似阳性培养物来自洁净操作区或由于实验人员操作不当导致的污染,则该实验结果应判为无效。若比对结果显示同源性较低,则需进一步回顾无菌实验过程。

转移培养,有规定要用多少培养基吗
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大师
发表于 2026-1-23 13:11:25 | 显示全部楼层
14天中,无论哪一天样品管长菌,都可以判定长菌。
至于是产品的问题,还是检验的问题,得去调查后才能判定。
所以,培养一天就浑浊了,你得先判断,是长菌了,还是啥原因。虽然长菌通常都会浑浊,但浑浊,不等于长菌,
别纠结了,及时报告吧,
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发表于 2026-1-23 15:19:09 | 显示全部楼层
入门者 发表于 2026-1-23 11:35
转移培养,有规定要用多少培养基吗

转移的话,既然是同种培养基,建议用同一规格的哈
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