蒲公英 - 制药技术的传播者 GMP理论的实践者

搜索
查看: 4721|回复: 25
收起左侧

[分析仪器] HPLC检测含量,对照品和供试品都不出峰

[复制链接]
发表于 2018-3-28 09:01:18 | 显示全部楼层 |阅读模式

欢迎您注册蒲公英

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册

x
色谱检测某物质含量时,以前检测对照和供试都可以出目标峰,昨天突然检测不到目标峰;检查紫外检测器的能量和氘灯使用时间都可以,之后更换另外的色谱柱一样检测不到目标峰,也将流动相、对照重新配过,进样还是不出峰,很是奇怪;有没有大神解答疑惑,不胜感激,在线等.

回复

使用道具 举报

药士
发表于 2018-3-28 09:07:17 | 显示全部楼层
先检查一下仪器设置参数(波长、流速、柱温等等)和流动相配置得是否正确
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 09:22:03 | 显示全部楼层
hongwei2000 发表于 2018-3-28 09:07
先检查一下仪器设置参数(波长、流速、柱温等等)和流动相配置得是否正确

这些检测条件都是正确的

点评

是否有漏液、流速是否准确 在低波长下(例如254nm以下)进一针丙酮溶液看是否有峰  详情 回复 发表于 2018-3-28 09:24
回复

使用道具 举报

药士
发表于 2018-3-28 09:24:17 | 显示全部楼层
平凡的葡萄糖 发表于 2018-3-28 09:22
这些检测条件都是正确的

是否有漏液、流速是否准确
在低波长下(例如254nm以下)进一针丙酮溶液看是否有峰
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 09:33:35 | 显示全部楼层
hongwei2000 发表于 2018-3-28 09:24
是否有漏液、流速是否准确
在低波长下(例如254nm以下)进一针丙酮溶液看是否有峰

流动相和溶剂都单独进样,溶剂峰可以出来,但就是目标峰不出来,也把仪器系统重新复位配置,一样的结果不出峰,而更换另一种对照品检测,却可以出峰,你说奇怪不奇怪

点评

另一种对照品? 同一方法两种对照品? 如果仪器是正常的 一般的原因不外几乎 1、仪器参数方法不对 2、流动相不对 3、对照品不对或对照品溶液配制不同 4、色谱柱不对  详情 回复 发表于 2018-3-28 09:36
回复

使用道具 举报

发表于 2018-3-28 09:36:45 | 显示全部楼层
检查泵压力是否正常,把色谱柱多冲冲再试一下看
回复

使用道具 举报

药士
发表于 2018-3-28 09:36:49 | 显示全部楼层
平凡的葡萄糖 发表于 2018-3-28 09:33
流动相和溶剂都单独进样,溶剂峰可以出来,但就是目标峰不出来,也把仪器系统重新复位配置,一样的结果不 ...

另一种对照品?
同一方法两种对照品?
如果仪器是正常的
一般的原因不外几乎
1、仪器参数方法不对
2、流动相不对
3、对照品不对或对照品溶液配制不同
4、色谱柱不对
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 09:41:09 | 显示全部楼层
hongwei2000 发表于 2018-3-28 09:36
另一种对照品?
同一方法两种对照品?
如果仪器是正常的

一药两种含量,两个检测方法,一个波长238nm,一个波长220nm,就是220的目标峰不出

点评

比较一下两个波长现在与之前的色谱图 波长相差不大 理论上两个波长下都会有两个峰存在 先看看存在的峰的峰位、峰形是否正常 必要的话可以用DAD看一下相应的峰位置  详情 回复 发表于 2018-3-28 11:02
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 09:42:39 | 显示全部楼层
huaiwanglei 发表于 2018-3-28 09:36
检查泵压力是否正常,把色谱柱多冲冲再试一下看

压力正常,色谱柱还是新的用的
回复

使用道具 举报

发表于 2018-3-28 10:10:07 | 显示全部楼层
1.色谱柱型号不对;2.流动相配制,是否更换了新的试剂试药;3.对照溶液配制;4.是等度方法还是梯度方法,检查比列阀分配
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 10:42:43 | 显示全部楼层
710073509 发表于 2018-3-28 10:10
1.色谱柱型号不对;2.流动相配制,是否更换了新的试剂试药;3.对照溶液配制;4.是等度方法还是梯度方法,检 ...

1、色谱柱一直用同一型号
2、流动相所有试剂都是新开瓶
3、对照也是新开瓶
4、等度洗脱这些条件都没有变换。
回复

使用道具 举报

发表于 2018-3-28 10:44:37 | 显示全部楼层
色谱微信群,加zorro_zheng,加时请提示制药.一可能是氘灯没点亮,二可能是信号线没连接好
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 10:49:08 | 显示全部楼层
herozxq 发表于 2018-3-28 10:44
色谱微信群,加zorro_zheng,加时请提示制药.一可能是氘灯没点亮,二可能是信号线没连接好

氘灯能量正常,可以点亮,信号线也没有问题。很烦恼
回复

使用道具 举报

药士
发表于 2018-3-28 11:02:16 | 显示全部楼层
平凡的葡萄糖 发表于 2018-3-28 09:41
一药两种含量,两个检测方法,一个波长238nm,一个波长220nm,就是220的目标峰不出

比较一下两个波长现在与之前的色谱图
波长相差不大
理论上两个波长下都会有两个峰存在
先看看存在的峰的峰位、峰形是否正常
必要的话可以用DAD看一下相应的峰位置
回复

使用道具 举报

发表于 2018-3-28 11:34:22 | 显示全部楼层
是不是自动进行器?应该是对照品和样品根本没有进入检测器,漏调了。我们以前也出现这样的情况。咨询下工程师。
回复

使用道具 举报

发表于 2018-3-28 11:50:03 | 显示全部楼层
我记得之前我们是进样器六通阀问题
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 13:09:46 | 显示全部楼层
莫颜雨 发表于 2018-3-28 11:34
是不是自动进行器?应该是对照品和样品根本没有进入检测器,漏调了。我们以前也出现这样的情况。咨询下工程 ...

手动进样,六通阀的,我们进另外一种对照则可以出峰的
回复

使用道具 举报

 楼主| 发表于 2018-3-28 13:15:41 | 显示全部楼层
hongwei2000 发表于 2018-3-28 11:02
比较一下两个波长现在与之前的色谱图
波长相差不大
理论上两个波长下都会有两个峰存在

一个238nm处的峰和之前比对是一致的,而220nm处没有目标峰,检测器是紫外检测器,不能像二极管阵列检测器一样做全波长检测,咨询工程师说是紫外检测器的问题,麻烦

点评

你不是混合对照品溶液吗 如果是的话应该是一针两图呀 无论是哪个波长 只不过峰大小不同而已  详情 回复 发表于 2018-3-28 13:26
回复

使用道具 举报

药士
发表于 2018-3-28 13:26:58 | 显示全部楼层
平凡的葡萄糖 发表于 2018-3-28 13:15
一个238nm处的峰和之前比对是一致的,而220nm处没有目标峰,检测器是紫外检测器,不能像二极管阵列检测器 ...

你不是混合对照品溶液吗
如果是的话应该是一针两峰呀
无论是哪个波长
只不过峰大小不同而已
回复

使用道具 举报

药徒
发表于 2018-3-28 13:33:27 | 显示全部楼层
要么流动相问题,要么比例阀问题
回复

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

×发帖声明
1、本站为技术交流论坛,发帖的内容具有互动属性。您在本站发布的内容:
①在无人回复的情况下,可以通过自助删帖功能随时删除(自助删帖功能关闭期间,可以联系管理员微信:8542508 处理。)
②在有人回复和讨论的情况下,主题帖和回复内容已构成一个不可分割的整体,您将不能直接删除该帖。
2、禁止发布任何涉政、涉黄赌毒及其他违反国家相关法律、法规、及本站版规的内容,详情请参阅《蒲公英论坛总版规》。
3、您在本站发表、转载的任何作品仅代表您个人观点,不代表本站观点。不要盗用有版权要求的作品,转贴请注明来源,否则文责自负。
4、请认真阅读上述条款,您发帖即代表接受上述条款。

QQ|手机版|蒲公英|ouryao|蒲公英 ( (京)-非经营性-2014-0058 京ICP证150354号 京ICP备14042168号-1 )

GMT+8, 2024-3-29 15:30

Powered by Discuz! X3.4运维单位:苏州豚鼠科技有限公司

Copyright © 2001-2020, Tencent Cloud.

声明:蒲公英网站所涉及的原创文章、文字内容、视频图片及首发资料,版权归作者及蒲公英网站所有,转载要在显著位置标明来源“蒲公英”;禁止任何形式的商业用途。违反上述声明的,本站及作者将追究法律责任。
快速回复 返回顶部 返回列表