大讨论：培养基灌装验证长菌事件调查

cph2345

五月初，一条新的注射剂车间进行了培养基灌装验证（第二次），结果在20-25度培养7天后，观察发现有很多样品长菌，整体长菌率超过50%，每个模拟动作的样品都有长菌情况，大家是否遇到这种情况，是哪方面出了问题会导致如此大的染菌率。希望大家多多发表高见。

hefeng

如果有条件的话，可以做个菌种鉴别，看看是哪种菌，常见的菌种可以来源的，如果不能鉴别是菌的类别，就比较麻烦了，各个方面都要找原因了，例如环境消毒、物品灭菌效果、水系统、空调系统、人员更衣或进出都有可能。

幻影

如果是第二次，分析为配料系统输送管道（尤其除菌过滤器后段）培养基没有清洗彻底导致内残存培养基，细菌孳生。

因为培养基较难清洗，建议考虑用碱液或专用的CIP清洗液清洗。

冰城

感觉是系统问题，培养基的灭菌效果是否达到要求。储罐、管道的处理方式值得确认。
应该是在灌装前出现的问题，因为如果是灌装线问题，结果会是前段长菌，因为随着稀释和冲洗，后段会好很多。
当然这要系统排查，瓶塞、水、洁净环境等。
不过个人侧重在灌装前的配制系统出现的问题。

冰城

感觉是系统问题，培养基的灭菌效果是否达到要求。储罐、管道的处理方式值得确认。
应该是在灌装前出现的问题，因为如果是灌装线问题，结果会是前段长菌，因为随着稀释和冲洗，后段会好很多。
当然这要系统排查，瓶塞、水、洁净环境等。
不过个人侧重在灌装前的配制系统出现的问题。

cph2345

幻影 发表于 2014-5-19 09:08
如果是第二次，分析为配料系统输送管道（尤其除菌过滤器后段）培养基没有清洗彻底导致内残存培养基，细菌孳 ...

第一培养基灌装后，进行了配料系统清洗，并检测了TOC，是符合注射用水标准的。培养基残留基本可以排除。

cph2345

hefeng 发表于 2014-5-19 09:07
如果有条件的话，可以做个菌种鉴别，看看是哪种菌，常见的菌种可以来源的，如果不能鉴别是菌的类别，就比较 ...

这边的QC没有做菌种鉴别的能力。

cph2345

hefeng 发表于 2014-5-19 09:07
如果有条件的话，可以做个菌种鉴别，看看是哪种菌，常见的菌种可以来源的，如果不能鉴别是菌的类别，就比较 ...

环境在培养基灌装前进行的孢子条挑战试验，用的是10的六次方的孢子条，均正常。人员更衣倒是有长菌的，但都不是操作人员，长菌的几个人是在中间过程的某个阶段进入的，长菌样品却是从开始就有的。灌装过程的沉降菌、浮游菌监测也都很正常。

幻影

cph2345 发表于 2014-5-19 09:19
第一培养基灌装后，进行了配料系统清洗，并检测了TOC，是符合注射用水标准的。培养基残留基本可以排除。

如果是取冲洗水检测TOC的话，要客观考虑，这么大的系统，这么大的清洗水量，如果系统内某死角内残存部分培养基，TOC合格很容易。

cph2345

575231000 发表于 2014-5-19 09:15
感觉是系统问题，培养基的灭菌效果是否达到要求。储罐、管道的处理方式值得确认。
应该是在灌装前出现的问 ...

我也感觉是系统的哪个方面出现了问题，这是污染率曲线，整个灌装阶段的样品都是有长菌的情况。

冰城

cph2345 发表于 2014-5-19 09:25
我也感觉是系统的哪个方面出现了问题，这是污染率曲线，整个灌装阶段的样品都是有长菌的情况。

所以我推荐优先排查配制系统的灭菌处理方式和效果。是否存在死角、和残留；包括滤芯是否处理到位。

hefeng

你们的注射剂是非无菌灭菌的？中间过程都是无菌操作控制吗？

病毒性感冒

不知道你方案是如何设计，是否有每步操作的取样进行对照培养。所以你找原因是非常难的，重做吧！

cph2345

幻影 发表于 2014-5-19 09:25
如果是取冲洗水检测TOC的话，要客观考虑，这么大的系统，这么大的清洗水量，如果系统内某死角内残存部分培 ...

这个还真不好确认，我需要跟操作人员确认。不过管路的CIP程序确实有问题。我前两天已经提出来了，还没有决定如何整改。

cph2345

575231000 发表于 2014-5-19 09:28
所以我推荐优先排查配制系统的灭菌处理方式和效果。是否存在死角、和残留；包括滤芯是否处理到位。

那个滤芯是上次清洁后，放置了15天后，没有再次清洗，直接灭菌使用的。这个问题我认为问题不是很大。

cph2345

hefeng 发表于 2014-5-19 09:29
你们的注射剂是非无菌灭菌的？中间过程都是无菌操作控制吗？

是非最终灭菌的无菌产品，整个过程是无菌操作。

cph2345

病毒性感冒 发表于 2014-5-19 09:30
不知道你方案是如何设计，是否有每步操作的取样进行对照培养。所以你找原因是非常难的，重做吧！

每个操作的样品都是单独分开的，但是每个操作的样品都有不同比例的长菌情况。

wuxufeng2001

整体都有菌的话，可能配制过滤系统SIP异常，或者除菌过滤异常导致。
检查一下配制系统及过滤器的SIP
除菌过滤过程是否有异常。
培养基配制到除菌过滤间隔时间多久？

幻影

cph2345 发表于 2014-5-19 09:46
这个还真不好确认，我需要跟操作人员确认。不过管路的CIP程序确实有问题。我前两天已经提出来了，还没有决 ...

培养基不好清洗，如果只是水洗的估计有问题。考虑上专用清洗液。

cph2345

wuxufeng2001 发表于 2014-5-19 09:53
整体都有菌的话，可能配制过滤系统SIP异常，或者除菌过滤异常导致。
检查一下配制系统及过滤器的SIP
除菌 ...

培养基是培养后进行了预过滤后打到配液罐中的，第二天进行培养基灌装。间隔也就20小时左右。